Как уже было доказано ранее, с возрастом женщины вероятность беременности и живорождений существенно снижается из-за уменьшения как количества, так и качества ооцитов, что приводит к повышению риска бесплодия, выкидышей и врожденных дефектов (Mosher and Pratt, 1991; Heffner, 2004; ESHRE Capri Workshop Group, 2008; Duncan et al., 2017).
Данное же исследование было направлено на выявление влияния старшего репродуктивного возраста (СРВ) матери на развитие клеток, выявленные морфокинетическим анализом, во время оплодотворения яйцеклетки и дальнейшего эмбрионального развития.
В общей сложности 1050 циклов у 1050 пациенток были проанализированы. При этом пациенты, нуждающиеся в хирургическом извлечении спермы и/или пациенты с повторной неудачной имплантацией, т.е. испытывающие четыре или более неудачных переносов эмбрионов, были исключены. Пациентки были классифицированы по возрасту матери в соответствии с классификацией Общества вспомогательных репродуктивных технологий (<35, 35–37, 38–40, 41–42 и >42 года).
Стимуляция проводилась кломифен цитратом, который вводили по расширенному режиму с 3-го дня цикла до индукции окончательного созревания ооцитов. Оплодотворение наблюдалось с помощью программного обеспечения EmbryoViewer (Vitrolife). Снимки делались через каждые 10 минут на 11 фокальных плоскостях в течение 5–7 дней культивирования.
Итак, результаты:
- Ранние стадии развития
Скорость развития, нерегулярность первого расщепления, тип и продолжительность движения бластомер, а также количество многоядерных клеток были сопоставимы среди возрастных групп. Кроме того, морфологические оценки во 2-й и 3-й дни культивирования были сопоставимы между группами.
- Стадии морулы и бластоцисты.
Задержка появления морлы наблюдалась в группе >42 лет. Скорость образования бластоцисты была значительно снижена в группах 41-42 и >42 лет. Морфология внутренней клеточной массы и трофэктодермы была значительно хуже в группе >42 лет. Это было подтверждено с помощью многомерного регрессионного анализа.
- Исходы беременности после разморозки бластоцист
Показатели имплантации, клинической беременности, продолжающейся беременности и живорождений были значительно снижены по мере увеличения возраста матери.
Все эмбрионы выжили после размораживания и не наблюдалось дегенерированных бластомеров как в молодой возрастной группе (<35 лет), так и в группе старшего возраста (>42 года). Многомерный анализ логистической регрессии также продемонстрировал связанное с возрастом снижение вероятности живорождения.
В этом исследовании обнаружили, что женский размер пронуклеуса значительно уменьшался с возрастом матери, но мужской пронуклеус не уменьшался. Эта разница может иметь отношение к снижению результативности ЭКО у женщин старшего репродуктивного возраста, хотя основополагающие механизмы не ясны.
Было выявлено, что длительный митоз и асинхронный распад пронуклеусов обычно связаны с аномальным делением ядер, что приводит к ошибкам сегрегации хромосом и образованию микроядер. Это может быть еще одной значительной причиной анеуплоидии эмбриона, полученного у женщины старшего репродуктивного возраста. Поэтому необходимы дальнейшие исследования, оценивающие связь между материнским пронуклеусом и плоидностью эмбриона.
Подтверждена повышенная частота остановки эмбрионов на стадии морулы у женщин СРВ, что согласуется с предыдущими исследованиями. Длительная бластуляция и плохая морфология могут быть связаны с митохондриальной дисфункцией, связанной с возрастом пациентки.
В совокупности эти данные свидетельствуют о том, что возраст матери влияет на ключевые функции морфогенеза эмбриона.