Продолжаем дальше про открытие гепатита В и как научная мысль привела к созданию вакцины.
Блумберг открыл гепатит В через австралийский антиген (это HbS антиген, одно и то же). А дальше то что? просто представьте, все, что вы знаете, это то, что у вас в руках пробирка, в ней жидкость, в которой плавает нечто, что вы сами назвали австралийский антиген. Вы знаете, что попадая в кровь, он вызывает длительную болезнь, с поражением печени. ВСЕ. Вы даже не знаете, что такое, этот австралийский антиген, кроме того, что это какая-то молекула от вируса, содержащая липид, имеющая большую молекулярную массу. или сам вирус. или вообще, что она делает и почему она отдельно от вируса вдруг или не отдельно...
ОЧень полезное открытие (сарказм)
Нужно исследовать дальше, чтобы открытие обрело реальную ценность.
В 1968 Блумерг и коллеги публикуют статью с подробностями:
Он описывает частицы, прилагая фотографии в электронном микроскопе, что нашли в большом количестве у людей, положительных на австралийский антиген (когорты с синдром Дауна, лейкемией).
Когда при аналогичных условиях и экспериментах смотрели под электронным микроскопом сыворотку людей отрицательных на Au, ни одних из этих частиц, замечено не было. ЧТо интересно, у 2 пациентов с лейкемией было только 2 формы частиц, бимодальное распределение, 100 и 200 ангестрем (это 10 в минус 10 метра).
Ученые сделали выводы, что вероятно, частицы связаны с австралийским антигеном, ибо только у Au+ пациентов они были обнаружены (плюс агрегация частиц специальной антисывороткой, а значит антиген находится на этих частицах(что реагирует с антителами из специальной антисыворотки)). Но природа этих частиц была непонятна.
Далее британские ученые (без всякого сарказма) и группа Дана публикует свою работу по частицам, с интересными выводами.
Исследуя частицы в сыворотках пациентов Au+ с гепатитом, он обнаружил частицы, диаметром 420 ангстрем, и предположили, что эти частицы могут быть полноценным вирусом и что гораздо более многочисленные частицы размером 220 нм. и длинные формы "австралийского антигена" являются всего лишь избыточным материалом оболочки вируса. Но подтвердить свои догадки без изолирования этих вирусных частиц, было невозможно.
Почему в крови людей с гепатитом В мы видим поверхностный антиген отдельно от инфекционных вирусных частиц? Почему столько много одних частиц по сравнению с цельной вирусной частицей? зачем столько производится антигена одного, вне вирусной частицы?
Собственно один гепатит В это знает. Считается, что так он регулирует иммунной системой, заставляя ее делать то, что нужно ему, чтобы вирусные частицы спокойно могли собраться на заводе в печеночной клетке.
Блумберг создает метод, чтобы изолировать австралийский антиген. В его голове конечно рождалась идея о создании антител, чтобы нейтрализовать вирус. Но будут ли эти антитела обезвреживать вирус?
"Удобные" пациенты для исследования защитного эффекта антител против Au– это пациенты на диализе. Был предложен дизайн на маленькой выборке: действие вакцины основано на том, что ученые сравнили частоту инфекции гепатита В (был Au-, стал Au+) у пациентов на почечном диализе, у которых антитела были получены естественным путем (ранее болели, были Au+, стали Au- плюс антитела к Au), с пациентами без антител. Итогом такого наблюдения было: пациенты с антителами имеют крайне низкий риск инфицирования. И вероятность не заразиться стримительно снижается, если у пациента нет антител. В любой момент времени такой пациент на диализе может заразиться.
На основании этого было предложено сформулировать клиническое исследование, чтобы испытывать первую "вакцину" от гепатита В.
"Такая схема может оказаться полезной, если в ходе предварительных исследований будет показано, что вакцина вызывает образование антител у пациентов и что защита от вируса гепатита В будет полезной для пациентов", – писали ученые в обосновании своего предложения.
Но чтобы получить антитела, нужно ввести кому-то австралийский антиген. А потом убедиться, что эти антитела будут защищать другую особь от инфицирования.
Для этого выбрали шимпанзе, и в 1976 году в Jama опубликована первая статья доклинических исследований по вакцине гепатита В:
Знаете что? оно работало. Плазму взяли у людей, инфицированных гепатитом В, выделили достаточное количество австралийского антигена (напоминаю, это поверхностный антиген, составная часть вируса гепатита В), очистили его от примесей (как возможно на тот момент), прогнали через формальдегид в течении 72 часов, развели до нужной концентрации белка и получился вакцинный препарат. Все это сделал Merck (не реклама, исторический факт). Далее он был проверен согласно правилам на тот момент, ученые также убедились, что вакцина не содержит вирус гепатита А.
Вакцину ввели обезьянкам трехкратно. Выработались антитела. Далее обезьянам ввели инфицирующие дозы вируса гепатита В внутривенно. И ни одна из них не заболела, чего не скажешь о контрольных обезьянах.
Оно правда работало. В распоряжении ученых оказалось 2 ценнейших инструмента: вакцина (антиген гепатита В), защищать уязвимых людей, а также рабочие антитела к вирусу гепатита В, по-нашему сегодня– иммуноглобулин против гепатита В, сыворотка.
Раз появился реально работающий иммуноглобулин, встал вопрос о младенцах и возможности прервать передачу мать– младенец, введя иммуноглобулин при рождении. Исследования начали проводится еще в 74 году, и все с безоговорочным результатом.
В 1981 году в ланцет выходят результаты двойного слепого контролируемого исследования иммуноглобулина по предовтращению вертикальной передачи (от инфицированных матерей):
Результаты на графике. Это 75% эффективность. (это пример одного из, их было много)
В 1980-81 мир увидел первые результаты испытаний вакцины от гепатита В, сделанной из плазмы инфицированных пациентов. Эффективность свыше 90%, если введено 3 дозы.
Но плазма.... вич...
видимо будет 3 часть. потому что еще на арену не выходили дрожжи.
Зы. Кстати... красивая и полезная картинка:
https://www.nature.com/articles/2181057a0
https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.73.3.955
https://viralzone.expasy.org/1280
