Преимплантационное генетическое тестирование — исследование генов эмбрионов, полученных методом ЭКО. Метод, который выявляет у эмбрионов, полученных в результате ЭКО, генные и хромосомные патологии, и позволяет переносить в полость матки пациентки только нормальные образцы.
ДАННАЯ СТАТЬЯ НЕ МОЖЕТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАНА ДЛЯ ПОСТАНОВКИ ДИАГНОЗА, НАЗНАЧЕНИЯ ЛЕЧЕНИЯ И НЕ ЗАМЕНЯЕТ ПРИЕМ ВРАЧА
Что такое ПГД при ЭКО?
Преимплантационная генетическая диагностика дает возможность проводить генетические анализы эмбриону до того, как он будет перенесен в матку. Обследование проводится в лаборатории, цель которого — выявить здоровые эмбрионы без каких-либо аномалий до их переноса в организм женщины. Такой отбор позволяет использовать для переноса только здоровые эмбрионы, что повышает шансы получить беременность, которая закончится рождением здорового малыша. Более того, анализ ПГД позволяет свести к минимуму риск рождения больного ребенка даже у тех родителей, которые имеют генетические нарушения.
Для семей, которые точно знают о наличии проблем, связанных с хромосомными перестройками и генными мутациями, ПГД особенно актуальна и является единственной диагностикой, благодаря которой можно родить здорового ребенка в рамках протокола экстракорпорального оплодотворения. Тест дает возможность выявить изменения в хромосомном наборе, нарушения структуры хромосом и генетического аппарата, мутации генов до этапа переноса эмбрионов. То есть врачи смогут обнаружить нездоровые эмбрионы до их подсадки в маточную полость пациентки. Для переноса отбирается самый жизнеспособный здоровый материал. Поэтому будущие мать и отец могут не переживать о том, что у них может появиться ребенок с синдромом Дауна или другими тяжелыми наследственными заболеваниями.
Для чего нужно ПГД эмбриона
ПГТ (ПГД хромосомных аномалий) позволяет обнаружить:
- нарушения эмбрионов высокого качества, у которых невозможно определить отклонения визуально;
- лишние либо недостающие хромосомы в клеточном ядре;
- участки ДНК, на которых удвоен генетический материал или наоборот, утрачен;
- любое количество вероятных отклонений;
- проанализировать весь хромосомный набор.
ПГТ-М (ПГД моногенных заболеваний) позволяет идентифицировать конкретную наследственную патологию. Исследование рекомендовано при высоком риске мутагенеза у будущего ребенка.
Показания к ПГТ эмбриона
- женщина рожала детей с хромосомными аномалиями или они были выявлены у плода;
- потенциальный отец или мать — носитель дефектного гена;
- высокий риск у ребенка развития моногенного заболевания (муковисцидоз, фенилкетонурия, спинальная мышечная атрофия, другие);
- генетический фактор мужского бесплодия;
- женский возраст 35 лет и старше;
- в анамнезе — больше двух неудачных попыток ЭКО;
- выкидыши — два и более раза в анамнезе;
- желание клиентов повысить шансы на успех в программе искусственного оплодотворения.
Каких целей позволяет достичь ПГТ (ПГД)
Геномед, Москва
- ПГТ на 24 хромосомы/24 хромосомы + транслокация (1 эмбрион, PGT-SNP) ПГТ-А и/или ПГТ-Т методом сравнительной геномной гибридизации. Преимплантационное генетическое тестирование "ПГТ-SNP" проводится методом хромосомного микроматричного анализа (ХМА) на микроматрицах высокой плотности. Оно позволяет определить различные виды хромосомного дисбаланса и генотип эмбриона.
- ПГТ Установление происхождения обнаруженной у эмбриона анеуплоидии (1 эмбрион). Исследование генетического материала родителей (и, при необходимости, других членов семьи) позволяет точно установить происхождение хромосомного дисбаланса.
- ПГТ предварительный этап моногенных заболеваний (PGT-M). Разработка индивидуальной тест-системы для каждого генетического варианта. Такая разработка включает в себя несколько этапов.
- Сбор информации об обнаруженном генетическом варианте у членов семьи, сбор анамнеза, оценка результатов ранее сделанных лабораторных тестов
- Определение патогенности обнаруженного варианта, частота в популяции, связь с конкретным генетическим заболеванием.
- Изучение строения генетического региона в котором обнаружен вариант, оценка возможностей разработки индивидуальной тест-системы.
- Разработка тест-системы с использованием синтезированных праймеров и валидация ее на референсном материале.
- ПГТ Диагностика моногенных заболеваний (PGT-M) (1 эмбрион). Исследование, которое позволяет определить является ли эмбрион здоровым или больным в случае конкретного моногенного заболевания. Тест проводится на окончательном этапе после индивидуальной разработки тест-системы специально для каждой пары на основе их генетических мутаций.
Ген-лаб, Москва
- ПГТ на 24 хромосомы (1 эмбрион, NGS). Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-А) методом секвенирования нового поколения (NGS). Позволяет определить хромосомные нарушения с высокой точностью. Позволяет выявить не только численные нарушения хромосом (анеуплоидии), но и сегментарные нарушения хромосом: делеции и дупликации (то есть потерю или удвоение участков хромосом).
- ПГТ на 24 хромосомы (1 эмбрион, NGS + ПЦР). Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-А) двумя методами: секвенирования нового поколения (NGS) и ПЦР. Для выполнения ПЦР необходимо предоставить кровь обоих биологических родителей. Позволяет выявить изменение плоидности эмбрионов (23,Х/69,ХХХ), происхождение выявленных анеуплоидий и однородительскую дисомию. Рекомендовано для увеличения точности проводимого ПГТ, а также в случаях повторных неудач ЭКО, особенно при неудачных переносах эуплоидных эмбрионов (ПГТ-А методом NGS или SNP).
- ПГТ-Т 24 хромосомы + транслокация (1 эмбрион, NGS). Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-Т) методом секвенирования нового поколения (NGS). Позволяет определить численные и сегментарные хромосомные нарушения, а также нарушения, связанные с носительством одним из партнеров или обоими партнерами структурных хромосомных перестроек – транслокаций.
- ПГТ-М подготовительный этап, одно заболевание в семье. Разработка индивидуальной тест-системы для последующего определения генетического статуса эмбрионов (здоровый, носитель, больной) в случае наличия моногенного заболевания в семье. Для проведения предварительного этапа требуется кровь обоих биологических родителей, в некоторых случаях также других членов семьи.
- ПГТ-М моногенного семейного заболевания, 1 эмбрион (только статус моногенного заболевания). Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-М), выполняется после подготовительного этапа, позволяет определить генетический статус эмбрионов (здоровый, носитель, больной) в случае наличия моногенного заболевания в семье.
- ПГТ-М моногенного семейного заболевания, 1 эмбрион (дополнительное исследование на анеуплоидии методом КФ-ПЦР). Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-А) методом ПЦР, выполняется в дополнение к ПГТ моногенного заболевания.
Плюсы ПГД
Преимплантационное тестирование позволяет
ПГТ-А на анеуплоидии
- Повысить результативность попытки ЭКО (эффективность возрастает приблизительно на 27%).
- Уменьшить риск самопроизвольного аборта на раннем сроке. При тяжелых генетических патологиях плода прерывание беременности происходит в 50-70% случаях на протяжении первого триместра.
- Минимизировать вероятность хромосомных нарушений у эмбриона, предназначенного для переноса в полость матки.
- Сократить количество попыток ЭКО, тем самым уменьшив финансовые затраты.
ПГД-М моногенных заболеваний
- Перенести в матку генетически здоровых эмбрионов.
- После ДНК-диагностики витрифицировать эмбрионы без патологических отклонений для переноса в последующем протоколе.
- Исследовать эмбриональный материал для исключения смешивания (контаминации) ДНК будущей матери и ребенка. При этом вероятность постановки неправильного диагноза практически нулевая.
- Одновременно выполнить ПГТ-А и ПГТ-М для исключения хромосомных перестроек и генных мутаций.
Как проводится преимплантационная генетическая диагностика
Этапы тестирования:
- Биопсия трофэктодермы с помощью специального микрокапилляра.
- Фиксация клеточных ядер на предметном стекле (слайде) для микроскопического исследования.
- Гибридизация (специфическое взаимодействие) меченых фрагментов ДНК (зондов). Каждая хромосомная пара помечается определенным флуоресцентным красителем для идентификации.
- Изучение флуоресцирующего материала под микроскопом, визуализация объекта изучения на компьютере. В ядрах подсчитываются хромосомы. При нормальном количестве бластоцисту можно переносить. Аномальные эмбрионы при трисомии (три хромосомы вместо пары) или моносомии (одна вместо двух) не переносят.
Мнение врача
Анализ чаще проводится пятидневным эмбрионам, но может выполняться и трехдневным. У трехдневок можно взять на исследование только одну, максимум две клетки (бластомеры). У бластоцисты (пятидневки) – 5-7 клеток. Выделяют их из трофэктодермы (внешний слой, формирующий плаценту).
Заведующая эмбриологической лабораторией, эмбриолог, кандидат биологических наук
Методы ПГД
- CGH (сравнительная геномная гибридизация) — дорогостоящая методика, требующая много времени. При использовании CGH бластоцисты криоконсервируют и переносят в криопротоколе;
- PCR (полимеразная цепная реакция) — проводится после обследования супругов. При выявлении определенной мутации у родителей (обоих или одного) ищут такую же аномалию у эмбриона. Таким образом выявляют моногенные хромосомные отклонения;
- NGS (Now-Generation Sequencing, массивное параллельное секвенирование) — полноценный дорогостоящий геномный анализ. Наиболее высокоразрешающая технология, позволяющая исследовать в рамках одной диагностики хромосомный набор и дефекты на любом отрезке хромосом.
Для эмбриона наименее травматична биопсия на пятые на сутки. У бластоцисты больше материала для анализа, практически отсутствует риск остановки формирования и дальнейшего развития.
Консультация заведующей эмбриологической лабораторией, к.м.н. Апрышко В.П.
ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ, НЕОБХОДИМА КОНСУЛЬТАЦИЯ СПЕЦИАЛИСТА
Источник: текст взят с сайта клиники АльтраВита
