Введение
Во время процедуры ЭКО о нормальном оплодотворении обычно свидетельствует появление двух пронуклеусов, один из которых возникает из ооцита, а
другой - из мужской гаметы. Предполагается, что эмбрионы, полученные из зигот с числом пронуклеусов, отличным от двух, обладают аномальной плоидностью, и их переноса обычно избегают из-за повышенного риска неудачной имплантации, выкидыша и развития пузырного заноса. Но нормальный хромосомный набор может быть и у эмбрионов, происходящих из зигот с аномальным количеством пронуклеусов, таких как 0pN, 1pN, 3pN и пр. Около 10% зигот имеют менее или более двух пронуклеусов и обычно подлежат утилизации.
В данной статье описан удачный клинический случай переноса эмбриона c 4PN. В результате переноса такой бластоцисты родился здоровый ребенок, которому сейчас 4 года и который не имеет явных нарушений здоровья или развития. Это первый подобный описанный случай. Ранее сообщалось о нормальных родах в результате переноса эмбриона, полученного из 3pN зиготы, а также из эмбрионов, происходящих из зигот 2/1 pN, т.е. зигот, демонстрирующих два одинаковые по размеру и один дополнительный маленький пронуклеусов.
Описание клинического случая
Перенос был выполнен у пары с длительным бесплодием после нескольких неудачных курсов ВРТ. У супруги не было выявлено значимых репродуктивных проблем, у супруга была диагностирована азооспермия идиопатического происхождения. В анамнезе у пары:
- 9 эпизодов ИКСИ с использованием сперматоизоидов, полученных путем биопсии яичка, беременности не было после эмбриотрансфера (все эмбрионы были низкого качества);
- 6 попыток внутриматочной инсеминация с донорским эякулятом - беременность не наступила ни в одном случае.
Кариотипы обоих партнеров в норме. По причине неудачных попыток предыдущих ЭКО и низкого качества эмбрионов, было решено использовать донорские ооциты и донорские сперматозоиды. На момент принятия этого решения обоим супругам исполнилось по 36 лет.
Был подобран донор, при стимуляции которого получили 11 зрелых ооцитов. Оплодотворение выполнялось с использованием ИКСИ. Через 19 часов после оплодотворения - 1 зигота имела 2pN , 4 зиготы - 3pN и еще одна —4 pN. На третьи сутки эмбрион 2pN дал высококачественного восьмиклеточного эмбриона, который был перенесен в матку. Оставшиеся эмбрионы 3 pN и 4pN культивировали далее, и четыре из них превратились в бластоцисты высшего качества к 5-му дню культивирования. На этом этапе процесс оплодотворения этих
эмбрионов был рассмотрен с помощью покадровой видеозаписи. Как и ожидалось из предыдущих сообщений об особенностях оплодотворения методом ИКСИ, было замечено, что дополнительные пронуклеусы явно имеют материнское происхождение. Более того, по крайней мере в одной из зигот пронуклеусы материнского происхождения имели заметно меньший диаметр по сравнению с мужскими пронуклеусами. Это заставило предположить о том, что произошла аберрации в сборке материнской пронуклеарной мембраны и что содержание женского хроматина в этих зиготах может быть нормальным (гаплоидным), но разделенным на небольшие пронуклеарные оболочки. Эмбрионы биопсировали и отправили на криоконсервацию.
Свежий перенос эмбриона третьего дня не привел к наступлению беременности. По согласованию с парой было решено определить статус плоидности биопсийных бластоцист вместо того, чтобы начинать новое донорское лечение. Была использована ПГТ, которая может выявить не только анеуплоидию (ПГТ-А), но и, что в данном случае более важно, статус плоидности эмбриона. Два исследуемые образца оказались диплоидными. Один из них (3pN) был анеуплоидным (моносомия 22), а другой (4pN) эуплоидным. Из оставшихся двух эмбрионов (оба 3pN) один, вероятно, был триплоидным, а другой, вероятно, тетраплоидным. После рассмотрения было решено провести эмбриотрансфер диплоидного эуплоидного эмбриона 4pN. Беременность протекала без отклонений, для оценки состояния плода были проведены только экспертные УЗИ (пара отказалась от дополнительных исследований, таких как амниоцентез). В результате на 40-й неделе беременности путем вагинальных родов родился здоровый ребенок мужского пола. Пара отказалась от дальнейшего генетического тестирования ребенка.
Интересно
🧐 Учитывая вероятно материнский фактор в формировании малого количества качественных эмбрионов, исследовали другие циклы стимуляции и методы лечения, проводимые с тем же донором яйцеклеток. Все последующие результаты оплодотворения были нормальными. Следовательно, высокая доля аномально оплодотворенных ооцитов при первом донорстве яйцеклеток связана с субоптимальным процессом созревания цитоплазмы в этой конкретной группе ооцитов.
🧐Также в исследовании авторы заметили, что диплоидный эуплоидный 4 pN эмбрион достиг степени зрелости быстрее на 7.2 ч, чем эмбрионы 4pN и 3 pN, но три- и тетраплоидные. Это говорит о том, что явно есть особенности развития диплоидных эмбрионов по сравнению с эмбрионами с увеличенным набором хромосом.
🧐Также исследователи при выполнении ПГТ-А эмбриона использовали дополнительные методы диагностики, чтобы исключить эмбрион с набором хромосом 92,XXYY, который при обычном ПГТ мог имитировать 46 ХY за счет кратного увеличения набора всех хромосом.
