ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ (ИФА) – лабораторный метод определения различных соединений (макромолекул, вирусов и пр.), в основе которого лежит реакция антиген-антитело.
Генетически чужеродные вещества, попадая в организм человека, вызывают специфические процессы, направленные на удаление этих веществ. Система организма, выполняющая данную функцию, называется иммунной системой, а сами процессы – иммунологическими.
Иммунная система представляет собой совокупность лимфоидных органов, которые функционируют согласованно за счет миграции лимфоцитов из крови в ткани и из ткани в кровь, медиаторов (посредников) и других факторов.
Иммунная система слагается из центральных и периферических органов. К центральным относят тимус и костный мозг. В них лимфоциты дифференцируются (созревают) до стадии функционально активной клетки. К периферическим органам иммунной системы принадлежат лимфатические узлы, селезенка, лимфоидные структуры пищеварительного тракта, аппендикс, миндалины. В этих органах лимфоциты контактируют с антигеном, взаимодействуют между собой и с другими элементами иммунной системы.
Практически все периферические органы иммунной системы являются фильтрами или барьерами для распознавания, захвата и расщепления антигена.
АНТИГЕН - любое вещество, несущее признаки генетически чужеродной информации, которое организм рассматривает как чужеродное или потенциально опасное и против которого начинает вырабатывать антитела (иммунный ответ).
Способность антигенов вызывать иммунный ответ называется иммуногенностью, а способность образовывать комплексы с антителами – антигенностью.
К антигенам относятся белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты, в том числе и в составе компонентов различных биологических структур (клеток, тканей, вирусов и т.д.).
АНТИТЕЛА – это специальные белки иммуноглобулины (Ig), которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого чужеродного агента в организм для борьбы с ним.
Антитела обладают способностью образовывать прочные комплексы с антигенами для последующего удаления их из организма.
ПОКАЗАНИЯ К ПРОВЕДЕНИЮ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ:
Острые и хронические бактериальные, вирусные и паразитарные инфекции.
В лабораторных исследованиях наибольшее распространение получил твердофазный иммуноферментный анализ.
В иммуноферментном анализе применяют ферменты, которые могут связывать антитела или антигены, меняют окраску специального хромогенного субстрата при взаимодействии с ним и могут быть зарегистрированы физико-химическим методом (методом спектрофотометрии, флуориметрическим, люминисцентным и др.).
ФЕРМЕНТ – это сложное органическое вещество, вырабатываемое живой клеткой, способствующее различным химическим реакциям, происходящим в организме.
ХРОМОГЕННЫЙ СУБСТРАТ – это вещество белковой природы, приобретающее определенную окраску после расщепления специфическим протеолитическим ферментом.
ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ - метод качественного и количественного анализа, основанный на избирательном поглощении инфракрасного, видимого или ультрафиолетового излучения молекулами определяемого компонента или его соединения с соответствующим реагентом.
При проведении иммуноферментного анализа в качестве твердой фазы используется поверхность лунок полистиролового планшета, на которую адсорбированы входящие в состав тест-системы известные антитела (против определяемого антигена).
В лунку вносят исследуемую сыворотку крови. При наличии искомого антигена он соединяется с антителом, и образуются комплексы. Лунки промывают и удаляют не связавшиеся компоненты. В лунки вносят антитела к искомому антигену, меченые ферментом. Меченые антитела присоединяются к предыдущему комплексу и также остаются на стенках. Затем в лунки добавляют специфичный для фермента субстрат (перекись водорода) и хромоген (ортофенилендиамин). Если в исследуемой жидкости был антиген, фермент взаимодействует с перекисью водорода и разлагает его.
Выделившийся при этом кислород окрашивает хромоген в желтый цвет. По интенсивности окрашивания, возникающего в результате реакции фермента и субстрата, можно судить о количестве антигенов.
По аналогичной схеме работают тест-системы для определения антител, но в качестве иммуносорбента в них используются антиген, а раствор, который добавляют, содержит раствор антигенов, меченных ферментом.
МЕТОД ИФА МОЖЕТ ПРИМЕНЯТЬСЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ:
1. Вирусных заболеваний;
2. Для диагностики инфекций, передающихся половым путем.
3. Уровня гормонов в эндокринологии.
4. Аутоантител и маркеров онкологических заболеваний в онкологии.
5. Общего IgE и специфических IgE антител в аллергологии.
6. Лекарственных препаратов, наркотиков в биологических образцах.
7. Белков сыворотки крови (ферритина, фибронектина и др.).
В ГБУ РК "Республиканская ветлаборатория" ИФА применяется для диагностики таких заболеваний как грипп птиц, африканская чума свиней, лейкоз, блютанг;
Преимущества иммуноферментного анализа по сравнению с другими методами определения антигенов и антител:
• высокая чувствительность (ИФА может обнаруживать одиночные молекулы анализируемого вещества);
• возможность использования минимальных объемов исследуемого материала;
• стабильность всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА при хранении;
• простота проведения реакции;
• возможность автоматизации всех этапов реакции;
• относительно низкая стоимость диагностических наборов.
Иммуноферментный анализ может давать ложноположительный результат:
• при наличии ревматоидного фактора в крови, который является антителом против собственных IgG;
• при различных системных заболеваниях;
• при нарушениях обменных процессов в организме;
• при приеме некоторых лекарственных препаратов.
Сдать анализы и оформить сопроводительный документ вы можете в одном месте, в отделе приёма и отбора проб РВЛ,
по адресу: г. Сыктывкар, ул. Северная 69
22-09-73 - приёмная
