В прошлой статье я обещал написать о том, что же, если не якобы бракованные вакуумные пробирки, на самом деле является причиной ложноположительного сифилиса при анализе венозной крови. В первую очередь, отмечу, что это бывает только в том случае, если проводить исследования сыворотки крови на сифилис методом MR или МРП, то есть микрореакции преципитации. Если же используется метод ИФА (иммуноферментного анализа), то ложноположительных результатов не бывает. Так вот, первой частью причины ошибочного диагноза (и иногда следующего за этим диагнозом повторного взятия крови у пациентов) является всё то же, упоминавшееся в прошлой статье, непереворачивание пробирок медсёстрами. Здесь скорее не вина медсестёр, а общая беда. Часто медсёстры говорят, что их учат переворачивать только пробирки с антикоагулянтами (то есть реагентами, препятствующими свёртыванию крови). А пробирки с активатором свёртывания якобы переворачивать не надо. Об истоках этого заблуждения ниже я ещё напишу. Нанесённый на стенки пластиковых вакуумных пробирок активатор свёртывания (его роль выполняет диоксид кремния) не перемешивается с кровью и растворяется не полностью. А раз активатор свёртывания не действует в полную силу, то каскад свёртывания крови проходит очень вяло. Чистой сыворотки в этом случае не получится. Далее случается и вторая часть причины ошибочного диагноза - пробирки не центрифугируются. А это уже прямое нарушение инструкции по серологическим исследованиям сыворотки. Тут уже о чистой сыворотке вообще говорить не приходится. Получается, что неразмешанные частицы диоксида кремния, не осевшие вместе с клетками крови в одном сгустке на дно пробирки при центрифугировании, загрязняют сыворотку (отходя от стенок пробирки позже, а не сразу после контакта с кровью). И при серологическом исследовании сыворотки не надлежащей чистоты происходит реакция агглютинации, которая и «портит» всю картину, выдавая в результате ложноположительный сифилис.
Теперь об истоках заблуждения, что якобы не нуждаются в переворачивании вакуумные пробирки для сыворотки (с красной крышкой). Дело в том, что 10-15 лет назад все пробирки были не пластиковыми, а стеклянными. А стекло состоит из кремния, который активирует процесс свёртывания крови. То есть кровь, попадая в стеклянную пробирку и контактируя с её стенками, ускоренно сворачивается, собираясь в сгусток и оседая на дно пробирки. А сверху остаётся сыворотка. То есть для сыворотки стеклянные пробирки были удобнее пластиковых, ОДНАКО, стекло хрупкое - уронили пробирку на пол - разбили. Ладно осколки, а если разбрызганная кровь была инфицированной? Или стеклянную пробирку могли случайно слегка ударить обо что-то, так легонько, что даже трещин не появилось. Хотя нет! трещины появились, но не видимые глазу - микротрещины. И при центрифугировании на высоких скоростях такая пробирка лопается. Вот весело-то лаборантам убирать кровь и осколки из центрифуги.
И вот ещё что. Если пробирка нужна для исследований не сыворотки, а цельной крови, то в неё добавляют различные антикоагулянты, предотвращающие свёртывание и образование сгустка крови. А как раз в этом случае стеклянные пробирки, активирующие процесс свёртывания крови, конфликтуют с реагентами-антикоагулянтами, предотвращающими процесс свёртывания. Цельная кровь получается не совсем жидкой, а с микросгустками.
ПОЭТОМУ ведущие мировые производители и адекватные китайские заводы уже давно сняли с производства стеклянные пробирки и заменили их на пластиковые, из биологически инертного полиэтилентерефталата (ПЭТ).
И вот в таких пробирках из ПЭТ, если в них нет никаких добавок вообще, кровь сворачивается плохо. Эта проблема легко решается распылением по внутренним поверхностям пробирки диоксида кремния — активатора свёртывания. Но он должен быть растворён в пробе крови путём перемешивания 2-3 раза на 180 градусов! А вот этого-то как раз многие медсёстры не делают, потому как не знают, не научены, что так делать необходимо. Резюмирую итог расследования — ложноположительный результат диагностики сифилиса методом микрореакции преципитации в серологических лабораториях случается из-за того, что вакуумные пробирки из ПЭТ с активатором свёртывания (красные крышки) не переворачивались 2-3 раза и не центрифугировались.
В следующих статьях напишу о других ошибках (явных и неявных) медсестёр на преаналитическом этапе лабораторных исследований венозной крови.