Вакуоли в бластоцистах. Эуплоидия и показатели живорождения.

Вакуоли

- это мембраносвязанные цитоплазматические включения, заполненные жидкостью и возникающие спонтанно или в результате слияния пузырьков, происходящих из аппарата Гольджи или гладкой мембраны эндоплазматического ретикулума.

Вакуоли разделяются на три типа:

1 - уже присутствующие в ооцитах;

2 - искусственно созданные

после ИКСИ;

3 - связанные с задержкой развития эмбриона.

Аномальный мейоз хромосом вызывает анеуплоидию в ооцитах человека.

Аутофагия — это процесс «самодеградации», при котором разрушаются дисфункциональные клеточные компоненты, в цитоплазме образуются везикулоподобные аутофагосомы, а дисфункциональные цитоплазматические компоненты и агрегаты белков разрушаются лизосомами.

Singla и др. на мышиной модели обнаружили, что анеуплоидные клетки у эмбрионов удалялись путем аутофагии.

При оплодотворении вакуолизированные ооциты метафазы II могут демонстрировать замедленное дробление или остановку развития.

На 2-е и 3-е сутки эмбрионального развития вероятность вакуолизации составляет примерно 2%, но максимальная вероятность вакуолеобразования достигла на 4-й день. Вакуоли в это время имеют тенденцию быть больше по количеству и размеру благодаря их слиянию.

Цель исследования:

выяснить, связано ли наличие вакуолей в биопсийных бластоцистах с вероятностью анеуплоидии и клиническими исходами.

Методы.

В этом исследовании ретроспективно проанализированы данные, полученные в ходе преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидию (ПГТ-А) , проведенного на 3351 бластоцисте от 826 пациентов в одном репродуктивном центре в период с августа 2018 г. по июль 2020 г.

Было выполнено 167 переносов одиночных эуплоидных бластоцист. Вакуоли, существующие в трофэктодерме или внутренней клеточной массе, наблюдали с помощью биопсии бластоцисты.

После биопсии все бластоцисты были витрифицированы, и в последующем цикле лечения был проведен перенос эмбрионов.

А - вакуоль в зрелом ооците; В - вакуоль в оплодотворенном ооците (2 pn); С - эмбрион стадии НК с множеством вакуолей; D - бластоциста с наличием вакуоли (V) на внутренней клеточной массе.

A, B, C - вакуоли в ооцитах; D, E, F - вакуоли в эмбрионах 1 суток развития (оценка оплодотворения); G, H, I - вакуоли в эмбрионах, состоящих из 2 клеток.

Результаты:

• Из 3351 бластоцисты от 826 пациентов в 903 (26,9%) обнаружены вакуоли.
• Вакуоль-положительная группа имела значительно более низкий процент эуплоидных бластоцист после ТЭ-биопсии, чем вакуоль-отрицательная группа (28,8% против 35,5%).
• Эмбрионы с вакуолями значительно чаще оказывались некачественными (30,6% против 18,2%).
• При сравнении вакуоль-положительных и вакуоль-отрицательных групп частота имплантации (40,6% против 52,7%) и частота рождаемости (31,3% против 48,6%) были значительно ниже в вакуоль-положительной группе.
• Однако частота бластоцист отличного качества (3,1% против 8,8%) и частота абортов (23,1% против 7,7%) между этими двумя группами существенно не различались.
• Эуплоидные бластоцисты были положительно связаны с отсутствием вакуолей, материнским возрастом и хорошим качеством эмбриона.
• Частота имплантации и живорождения была значительно ниже для перенесенных одиночных эуплоидных бластоцист с вакуолями, чем без них (35,5% против 56,6%; 29,0% против 52,2% соответственно).
• Живорождение былоположительно связано с отсутствием вакуолей.

Заключение.

Вакуолизация является важным дисморфизмом, который часто обнаруживается как с помощью световой, так и с помощью просвечивающей электронной микроскопии в зрелых ооцитах человека.

Образование вакуолей в бластоцистах связано с более низкими показателями эуплоидии и живорождения.

Таким образом, бластоцисты без вакуолей должны быть приоритетными для переноса эмбрионов в цикла ЭКО.