Фомоз рапса вызывается грибом Leptosphaeria maculans (Phoma lingam) и поражает как всходы, так и взрослые растения масличного рапса. Болезнь приводит к некрозу прикорневой части стебля, появлению сухих вдавленных пятен с черными пикнидами, выпадению растений и заметному снижению урожайности семян и зеленой массы — иногда более чем на 50%.
Как разработали методику
Специалисты Всероссийского центра карантина растений (ФГБУ «ВНИИКР» Россельхознадзора) проверили, насколько эффективно выявлять фомоз рапса в семенах с помощью ПЦР в режиме реального времени.
Для этого подготовили пять вариантов образцов, каждый — по 400 семян рапса с разной степенью заражения. Затем из каждой пробы в шести повторностях выделяли ДНК и проводили модифицированную ПЦР с интеркалирующим красителем Eva Green.
Что показали результаты
Методика продемонстрировала высокую чувствительность. При концентрации возбудителя 4 × 10⁴ клеток гриба на миллилитр заражение определялось со 100%-й точностью. При более низкой концентрации — 4 × 10³ клеток гриба на миллилитр — положительный результат получали в 70% образцов.
Во всех пробах успешно прошел внутренний положительный контроль, а это подтверждает достоверность результатов и отсутствие подавления реакции.
Почему это важно
Новая схема диагностики позволяет быстро выявлять L. maculans в семенах рапса, которые проходят фитосанитарный контроль. Для карантинной и лабораторной практики это особенно ценно, потому что скорость и надежность исследования напрямую влияют на принятие решений по партии семян.
Разработанный подход включает подготовку образцов, выделение ДНК и проведение ПЦР с красителем, поэтому его можно применять как готовую методику лабораторной диагностики фомоза рапса.