Частота встречаемости эмбрионов, рекомендованных к переносу по результатам преимплантационного генетического тестирования на моногенное заболевание (ПГТ-М)
Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ), выполненное в программе ЭКО, является революционным способом скрининга эмбриона на генетические и хромосомные нарушения до момента его переноса в полость матки с целью достижения беременности. Способность ПГТ увеличить шансы на успешную беременность и привести к рождению детей без наследственных заболеваний (ПГТ-М ) меняет жизнь многих людей. Однако поиск соответствующего эмбриона, который даст рождение здорового ребенка, может потребовать неоднократных попыток и, в конечном счете, гарантий на успешный перенос и живорождение нет. Поэтому консультирование пациентов относительно ожиданий перед началом программы ЭКО с ПГТ очень важно.
ПГТ может проводиться по различным причинам:
- не менее 20% всех текущих случаев ПГТ проводятся с целью исключения моногенного заболевания (ПГТ-М). Как известно, ПГТ-М может использоваться пациентами, у которых в личном или семейном анамнезе есть генетическое заболевание, которое они не хотят передавать потомству. Кроме того, ПГТ-M все чаще проводится после выявления репродуктивного риска у пары посредством расширенного скрининга на носительство моногенного заболевания.
- Было показано, что ПГТ-А увеличивает частоту наступления беременности, особенно в группе пациенток старшего репродуктивного возраста, путем выявления анеуплоидных эмбрионов. Хорошо известно, что частота анеуплоидии увеличивается с возрастом матери, но может встречаться и у пациенток молодого возраста ( до 35 лет).
ПГТ-А может обнаружить полную анеуплоидию, а также мозаичную анеуплоидию, при которой часть клеток несет в себе правильный хромосомный набор, а часть- неправильный. Проблема мозаицизма ставит под сомнение клиническую значимость ПГТ-А, а также под вопросом остается необходимость проведения ПГТ-А в молодой группе пациенток. Эмбрионы с мозаичными результатами ПГТ-А с меньшей вероятностью имплантируются после переноса и с большей вероятностью могут привести к выкидышу. ❗👆Но в тоже время около 20–40% эмбрионов с мозаичными результатами, которых все-таки переносят в полость матки, приводят к рождению здоровых детей. Из-за возможности принятия сложных решений в случае мозаичного результата необходимо проводить консультирование пациентов о возможных заключениях генетической лаборатории, если пара планирует программу с ПГТ-А.
Это исследование даст результаты, которые можно обсудить с пациентами, рассматривающими ПГТ-М, давая им более точные ожидания от процесса ПГТ. Мы предполагаем, что количество эмбрионов, подходящих для переноса, будет различаться в зависимости от модели наследования и между пациентами, которые проводят только ПГТ-М и теми, кто проводит ПГТ-М вместе с ПГТ-А.
Цель: определить конкретные вероятности того, что эмбрион будет классифицирован как "рекомендованный к переносу" по результатам преимплантационного генетического тестирования на выявление моногенного заболевания (ПГТ-M) в совокупности с преимплантационным генетическим тестированием на анеуплоидии или без него (ПГТ-A), разделенных по типу наследования
Методы: ретроспективный обзор 181 выбранного цикла ПГТ-M, проведенного в генетической лаборатории CooperGenomics в 2018 или 2019 году, Кейсовский университет Западного района, Кливленд, штат Огайо, США.
Средний возраст пациенток составлял 33,29 года в группе "только ПГТ-М" и 33,98 года в группе "ПГТ-М+ ПГТ-А"
Было выделено 6 категорий:
- ПГТ-М+ПГТ-А, аутосомно-доминантный тип наследования заболевания;
- ПГТ-М+ПГТ-А, аутосомно-рецессивный тип наследования;
- ПГТ-М+ПГТ-А, сцепленный с Х-хромосомой тип наследования;
- только ПГТ-М, аутосомно-доминантный;
- только ПГТ-М, аутосомно-рецессивный;
- только ПГТ-М, сцепленный с Х-хромосомой.
Какой эмбрион был "рекомендован к переносу" ?:
- Для аутосомно-доминантного нарушения-эмбрионы, гомозиготные по нормальному аллелю
- Для аутосомно-рецессивного нарушения-эмбрионы, гомозиготные по нормальному аллелю и гетерозиготные носители
- Для Х-сцепленных заболеваний: эмбрионы мужского пола и эмбрионы женского пола, не являющиеся носителями
- при синдроме ломкой Х-хромосомы-только неносители и носители промежуточных аллелей (наличие премутаций и полных мутаций исключало данный эмбрион)
Какие эмбрионы классифицировались как "не рекомендованные к переносу"?
- пораженные моногенным заболеванием
- анеуплоидные
- мозаики
- если статус не может быть определен из-за рекомбинации с участием варианта гена
- идентифицируются как хромосомно- аномальный («хромосомно аномальный» — результат ПГТ-М, отличный от анеуплоидии по результатам ПГТ-A),
- если не получен результат ни для анализа ПГТ-М, ни для анализа ПГТ-А из-за недостаточного качества/количества ДНК (в случаях повторной биопсии результаты не входили в данное исследование)
Классификация плоидности с помощью секвенирования следующего поколения в CooperGenomics :
- эуплоидные эмбрионы при анеуплоидии < 20%
- анеуплоидные, если анеуплоидия > 80%
Интерпретация результатов мозаицизма ( биопсия 5 клеток):
- низкая сепень мозаицизма- 20–40% аномальных клеткок
- высокая степень мозаицизма- 40–80% аномальных клеткок
❗❗❗👆Результаты:
✔ПГТ-М+ ПГТ-А одновременно- 249 эмбрионов, 63- поражены моногенным заболеванием и анеуплоидны (25,3%)
✔Сначала ПГТ-М- 318 эмбрионов, 98- поражены (30,8%), ПГТ-А не проводилось
✔Сначала ПГТ-А-156 эмбрионов, 58- анеуплоидны (37,2%), ПГТ-М не проводилось
✔ПГТ-М, аутосомно-доминантный тип наследования- 55 эмбрионов здоровые (45,8%)
✔ПГТ-М, аутосомно-рецессивный тип наследования- 69 эмбрионов здоровые (69%)
✔ПГТ-М, сцепленный с Х-хромосомой тип наследования- 22 эмбриона здоровые (47,8%)
✔ПГТ-М+ПГТ-А, аутосомно-доминантный тип наследования- 80 эмбрионов здоровые ( 29.4%)
✔ПГТ-М+ ПГТ-А, аутосомно-рецессивный тип наследования- 112 эмбрионов здоровые ( 41%)
✔ПГТ-М+ПГТ-А, сцепленный с Х-хромосомой тип наследования- 40 эмбрионов здоровые ( 22,2%)
✔«Пораженные и эуплоидные» и «непораженные и анеуплоидные»- частота встречаемости аналогична для аутосомно- доминантного (13% и 14% соответственно) и сцепленного с Х-хромосомой (20% и 17% соответственно) типа наследования, но результаты дискордантны по отношению к аутосомно-рецессивному ( 5% и 22% соответственно)
✔Из 991 эмбриона в данных PGT-M 27 эмбрионов оказались хромосомно аномальными (2,7%) через кариомаппинг, указывающий на триплоидный или гаплоидный эмбрион. Из них у 17 был проведен анализ ПГТ-А, который показал 8 триплоидных, 5 гаплоидных, 1 -X мозаичный, 2 анеуплоидных с ≥ 3 находками (сложные аномальный), 1 с частичной моносомией и 1 эуплоидный. 14 из 991 эмбриона были рекомбинантными (1,4%). 42 из 991 эмбриона «результата не было» (4,2%)
✔Из 570 эмбрионов, полученных от пациенток, которые хотели знать информацию о мозаицизме - 67 были мозаиками (11,75%), 28,4% были с низким уровнем мозаицизма, 53,7% - с высоким, а 17,9% имели 3 или более мозаичных находок, поэтому были отмечены как патологические.
Наиболее распространенные аутосомно-доминантные, аутосомно-рецессивные, и Х-сцепленные заболевания, которые подвергались скринингу, включали предрасположенность к раку молочной железы и к раку яичников (n = 14), кистозный фиброз (n = 21) и синдром ломкой Х-хромосомы (n = 27)
Обсуждение:
🔸 Наши данные показывают, что включение анализа PGT-A приводит к значительно меньшему количеству эмбрионов, подходящих для переноса, по аутосомно-рецессивному и сцепленному с Х-хромосомой состоянию и предполагают тот же результат при аутосомно-доминантных состояниях
🔸В случае заболевания с аутосомно-рецессивным типом наследования можно ожидать, что 75% эмбрионов будут пригодными для переноса по результатам ПГТ-М, по сравнению с 50% для заболеваний с аутосомно-доминантным типом наследования
🔸Будущие исследования должны определить, в каком возрасте риск анеуплоидии превышает риск поражения моногенным заболеванием? В нашем исследовании, больше эмбрионов в аутосомно-рецессивной группе анеуплоидные и не подвержены моногенному заболеванию, чем поражены моногенной болезнью и эуплоидны. Анализ ПГТ-А сокращает пул эмбрионов, пригодных для переноса во всех группах, но может оказать наибольшее влияние при тестировании для аутосомно-рецессивного состояния, так как во всех возрастных группах эмбрион может подвергаться большему риску анеуплоидии чем моногенному заболеванию.
🔸Для аутосомно-доминантного и Х-сцепленных состояний, в будущем исследовании можно было бы изучить, с какого возраста анеуплоидия становится более вероятной, чем пораженность моногенным заболеванием
🔸некоторые системы здравоохранения не предлагают анализ ПГТ-A из-за полемики относительно клинической полезности и медицинской необходимости. Точно так же многие страховые компании покрывают ПГT-M, но не покрывает PGT-A, поэтому страховка может повлиять на это решение. Поскольку стоимость ЭКО с проведением ПГТ зависит от количества проанализированных образцов, страховые полисы и социально-экономические статус может также повлиять на тип тестирования (серийный или одновременный), выбранный теми, кто включает ПГТ-А
🔸 ПГТ-М основан на анализе сцепления, поэтому если рекомбинация происходит рядом с интересующими локусами, пораженность может быть не определена. Кроме того, проблемы в интерпретации результатов могут быть связаны с недостаточным количеством или качеством ДНК
Заключение:
➡Это исследование определило различия в частоте доступных для переноса эмбрионов в группе только ПГТ-М по сравнению с группой ПГТ-М+ПГТ-А и рассчитало среднее количество доступных для переноса эмбрионов в каждой из этих групп для каждого типа наследования
➡Результаты этого исследования дают дополнительные данные, которые, если их воспроизвести в более крупном исследовании, могут быть интегрированы в процесс получения информированного согласия и могут быть инструментом, помогающим управлять ожиданиями пациентов в отношении результатов ПГТ-М и ПГТ-А до начала цикла
