Диализ — отделение низкомолекулярных примесей или изменение солевого состава среды за счёт низкомолекулярного растворителя и полунепроницаемой мембраны.
Метод основан на том, что молекулы белка из-за своих размеров не могут проходить через полупроницаемые мембраны, в то время как низкомолекулярные вещества равномерно распределяются между объемом, ограниченным мембраной, и окружающим раствором. После многократной замены внешнего раствора состав среды в диализном мешочке (концентрация солей, величина pH и др.) будет тот же, что и в окружающем растворе. Диализ используется для широкого спектра применений: обессоливание, буферный обмен, удаление меченых реагентов, исследования связывания лекарств, рост и кормление клеток, очистка вирусов и обработка крови.
Продукция Thermo Fisher Scientific (Pierce) для диализа даёт возможность диализовать образцы в широком диапазоне объёмов от 10 мкл до 250 мл. Специальные диализные ёмкости не требуют применения клипс и других дополнительных приспособлений, что позволяет сэкономить время и избегать потерь или загрязнений образца.
Продукты серии Slide-A-Lyzer снабжены MWCO-мембраной (molecular weight cut-off, отсечка по молекулярной массе), предназначенной для диализа молекул с молекулярным весом до 2; 3,5; 7; 10 или 20 кДа. Характеристика разделения, определяемая диапазоном размеров пор диализной мембраны, чаще всего называется молекулярной массой (MWCO) мембраны. Традиционно MWCO мембраны относятся к наименьшей средней молекулярной массе стандартной молекулы, которая не будет эффективно диффундировать через мембрану. Как правило, самая маленькая глобулярная макромолекула (в дальтонах), которая удерживается более чем на 90% при расширенном диализе (в течение ночи), определяет номинальный MWCO. Таким образом, диализная мембрана с 10K MWCO обычно будет содержать белки, имеющие молекулярную массу по меньшей мере 10 кДа.
Более подробную информацию вы можете прочитать здесь.
