Аденозиновый след в работах про бензодиазепины

Аденозиновый след в работах про бензодиазепины

В чате задали вопрос относительно влияния бензодиазепинов на аденозиновую систему и привели несколько ссылок. Данное утверждение является частью устоявшегося мифа, который тянется с 80-х годов. Джон Филлис был главным идеологом «аденозиновой теории» действия БДЗ. В его работах (1979–1982 гг.) было показано, что БДЗ тормозят захват аденозина. Пройдемся по слабым местам этой гипотезы.

1. Артефакт высокой дозы. Многочисленные современные исследования радиолигандного связывания показали, что бензодиазепины и их производные обладают ничтожным сродством к аденозиновым рецепторам (> 100 мкмоль/л). В плазме крови человека даже для низкопотентных бдз, типа хлордиазепоксида это десятки нмоль/л. В физиологических концентрациях связывание невозможно. Когда это происходит в работах? Иногда используются нерелевантные пути, такие как внутрибрюшинный, который почти эквивалентен внутривенному у человека, что создает большой Cmax после введения. В сочетании с конскими дозами на грызунах, 10-20 мг/кг диазепама например, могут возникнуть некие аденозиноподобные артефакты за счет офф-таргет мишеней, в частности сродства к нуклеозидному транспортеру 1 типа (ENT1). Есть исключение - это мидазолам. Он обладает наибольшим сродством к этому транспортеру "Ki: 6 µmol/L for dis- placement of [3H] NBMPR " , при этом в эксперименте мы достигаем "169.5 ng/mL* [98] (7.5 mg; iv)" . Смотрите, что нужно сделать, когда вы читаете такие статьи. Есть инструмент как приблизительно оценить может ли вещество оказать значимый эффект на мишень.

Берется формула (Cmax × fu)/Ki or (Cmax × fu)/IC50 . Для самого мощного ингибитора ENT1 среди БДЗ, если подставить данные в формулу, то мы получим < 0,02. В этой работе уже провели такие расчеты . При значение 1, концентрация достигает необходимой для оккупирования/активации половины мишеней, тут связывание <1 %, что клинические неважно и просто бессмысленно.

2. Функциональная идентичность. Аденозин и ГАМК — это две основные тормозные системы мозга, которые тесно «переплетены». Когда БДЗ усиливают ГАМК-ергическую передачу, это приводит к снижению нейрональной активности, что снижает потребление АТФ и, соответственно, продукцию аденозина. Ошибка интерпретации: исследователи видят изменение уровня аденозина и делают вывод о прямом действии, хотя это лишь вторичный метаболический ответ на глубокое угнетение ЦНС.

3. Неспецифичность антагонистов. Часто доказательством связи служит то, что теофиллин (антагонист аденозина) уменьшает седацию от диазепама. Однако теофиллин является неспецифическим стимулятором ЦНС и может просто «перекрывать» эффект БДЗ за счет общего возбуждающего действия, не взаимодействуя с ними на молекулярном уровне. Я уже писал, что прием "взять антагонист и отменить эффект вещества не равно доказать его механизм". Если вы взяли резерпиновую модель депрессии, где агент истощает запас через блокаду VMAT2 и вылечили депрессию имипрамином, это не значит, что имипрамин активатор VMAT2, если на скополоминовой модели амнезии рацетам отменил нарушение обучения это не значит, что он обладает холиномиметическим эффектом, ну и так далее по аналогии. Единственная железобетонная конструкция по доказательству механизма действия - это генноинженерная/оптогенетическая модель, где мишень выключают во взрослой особи, демонстрируют отсутствие эффекта вещества, затем восстанавливают активность/экспрессию и повторяют эксперимент, где эффект должен вернуться.

Пару слов о систематической ошибке таких работ. При приготовлении срезов мозга, а это еще как минимум одна работа про БДЗ и аденозин, существует описанный и изученный артефакт - приготовление срезов сопровождается ишемией и физическим давлением на мембрану, которая уже приводит к повышению концентрации аденозина.