За последние три десятилетия предимплантационное генетическое тестирование стало значительным достижением в области ВРТ и оказало важную поддержку парам, страдающим бесплодием, невынашиванием и моногенными нарушениями. На сегодняшний день в результате ПГТ родились тысячи здоровых детей.
Выделяют три типа в зависимости от его применения:
✅предимплантационное генетическое тестирование на анеуплоидию (pgt-a), направленное на выявление анеуплоидии путем выявления аномалий, связанных с дополнительными или отсутствующими хромосомами;
✅предимплантационное генетическое тестирование на структурную перестройку (pgt-sr), использующее, когда один или оба родителя являются носителями сбалансированных структурных перестроек хромосом, таких как транслокации или инверсии;
✅предимплантационное генетическое тестирование на моногенные заболевания (pgt-m), направленное на выявление заболеваний, вызванных мутациями в одном гене.
Успешное проведение ПГТ зависит от наличия определенного количества высококачественных биопсированных клеток, что облегчает повторную обработку, стабильность и чувствительность последующих процедур амплификации и молекулярного тестирования.
Биопсия трофэктодермы, благодаря ее минимальному воздействию на потенциал развития эмбриона, стала основным методом биопсии при проведении ПГТ. Обычно биопсия трофэктодермы проводится на 5-6-й день после ИКСИ и позволяет получить 5-8 клеток из бластоцист для отбора проб. Недостаточное количество клеток может привести к неиформативности теста, в то время как чрезмерное количество, как предполагается, снижает скорость имплантации эмбрионов из-за таких факторов, как потенциальное повреждение клеток, оказывающее негативное влияние на клинические исходы.
Предыдущие исследования влияния количества взятых при биопсии клеток на исход беременности у эмбрионов показали противоречивые результаты. Некоторые сообщали, что клинические исходы беременности значительно снижаются, когда количество взятых на биопсию клеток увеличивается с 5 до 10, приводя неудачной имплантации, выкидышам или биохимической беременности.
На сегодняшний день нет однозначного ответа относительно влияния количества взятых при биопсии клеток на исходы беременности. Достижения в области технологий полногеномной амплификации (wga) сделали более возможной амплификацию следовых ДНК. Среди этих технология malbac, основанная на циклической амплификации, отличается сокращением объема выборки для секвенирования генома до уровня пикограмм, а также такими преимуществами, как равномерная амплификация, высокий охват, низкая погрешность и низкая частота делеций. Также обеспечивает как успешную амплификацию, так и сохранение ограниченного количества клеток для последующей проверки и хранения, что позволяет точно подсчитать количество биопсированных клеток и облегчает всестороннее изучение влияния количества биопсированных клеток на потенциал имплантации эмбриона и его дальнейшее развитие.
Предыдущие исследования, посвященные корреляции между количеством взятых при биопсии клеток и исходами беременности были сосредоточены только у пациенток, которым проводится ПГТ-А. Однако показания к ПГТ-А, такие как старший репродуктивный возраст, повторные неудачи имплантации и выраженный мужской фактор, включают патологические состояния, которые влияют на гаметогенез или приводят к аномальному развитию эмбриона, что представляет собой существенные мешающие факторы. Более полезные данные о биопсии трофэктодермы и других тестах ПГТ, таких как ПГТ-SR и ПГТ-М, скудны.
Чтобы восполнить этот пробел в знаниях, проведено ретроспективное исследование биопсийных клеток эмбрионов, подвергшихся ПГТ-М, в котором использовалась амплификация malbac для геномного тестирования, чтобы определить, влияет ли количество биопсийных клеток на клинические исходы беременности.
. 🟠Материалы и методы🟠
В это исследование были включены 850 бластоцист, полученных от 605 супружеских пар, которым были проведены циклы ПГТ в период с мая 2014 по август 2024 года в больнице Пекинского университета. Эти пары обратились за медицинской помощью в связи с различными моногенными нарушениями.
Для дальнейшего анализа данных разделили 850 пациентов на четыре группы в зависимости от количества взятых при биопсии клеток следующим образом:
✅группа 1 (1-5 клеток) (n = 234),
✅группа 2 (6-10 клеток) (n = 328),
✅группа 3 (11-15 клеток) (n = 192) и
✅группа 4 (>15 клеток) (n = 96)
между четырьмя группами не было существенных различий в отношении возраста партнеров, показателей ИМТ матерей, гендерного распределения носителей документированных генетических мутаций, количества извлеченных яйцеклеток, яйцеклеток mII, эмбрионов 2pn или качества бластоцист. Не было выявлено существенных различий в биохимических показателях наступления беременности между четырьмя группами.
. 🟠Результаты🟠
✅в группе с биопсией 1-5 клеток наступление беременности, подтвержденное биохимически произошло у 129 из 234 эмбрионов (55,1%). В группе с биопсией 6-10 клеток — у 183 из 328 эмбрионов (55,8%). В группе с биопсией 11-15 клеток — у 92 из 192 эмбрионов (47,9%). В группе с биопсией более 15 клеток — у 48 из 96 эмбрионов (50,0%). Разницы в частоте наступления беременности между группами не было (p = 0,288).
✅в группе с биопсией 1-5 клеток в четырех случаях зафиксирована потеря беременности.
✅В группе с биопсией 6-10 клеток был только один случай внематочной беременности из 448 пар с подтвержденной клинической беременностью.
✅Выкидыши произошли у 49 пар, большинство на ранних сроках.
✅Показатели живорождения составили 42,7%, 49,7%, 43,2% и 43,8% для каждой группы соответственно. Различий между группами не обнаружено (p > 0,05).
✅Сроки беременности и вес новорожденных также не различались.
✅Наблюдение за детьми не выявило отклонений в развитии.
. 🟠Заключение🟠
Проведенное исследование демонстрирует, что количество клеток, взятых для биопсии в ходе рутинной ПГТ, не имеет существенной связи с клиническими исходами беременности и показателями живорождения. Количество этих клеток в первую очередь коррелирует с качеством бластоцисты и ее инкубационным статусом. Это исследование предоставляет новые доказательства безопасности результатов биопсии клеток при ПГТ и требует дальнейшей проверки с помощью многоцентровых когортных исследований.