Определение оптимальной точки инъекции при Пьезо-ИКСИ

В чем отличие Пьезо-ИКСИ от классического ИКСИ?

Чтобы ввести сперматозоид в цитоплазму ооцита необходимо пройти сквозь зону пеллюцида и оолемму (цитоплазматическую мембрану ооцита).

В случае классического ИКСИ прохождение этих двух барьеров осуществляется за счет сильного надавливания острого конца иглы на оболочку ооцита.

Оолемма обладает значительно большей степенью растяжимости, и простого давления на нее недостаточно. Чтобы произошел разрыв цитоплазматической мембраны, необходимо обеспечить отрицательное давление за счет аспирации ее в иглу, и только затем ввести сперматозоид внутрь ооцита.

В случае Пьезо-ИКСИ не требуется сильного давления иглы на зону пеллюцида и оолемму.

Сначала за счет переменного тока в зоне вырезается небольшое отверстие, через которое свободно вводится игла. Для прохождения оолеммы достаточно одного импульса. Аспирация не требуется.

Таким образом, Пьезо-ИКСИ позволяет ввести сперматозоид внутрь ооцита без сильного надавливания и аспирации содержимого ооцита.

Вероятно, именно эти моменты делают процедуру оплодотворения более щадящей, снижая вероятность "непреднамеренного разрыва мембраны" НРМ, который может привести к последующей дегенерации ооцита.

Методика Пьезо-ИКСИ получила распространение в Японии для оплодотворения "хрупких" ооцитов (также следует отметить, что в Японии запрещено донорство ооцитов).

Авторы данной статьи предположили, что растяжимость оолеммы на отдельных ее участках неоднородна, и вероятность НРМ может зависеть от точки инъекции сперматозоида.

Для выбора оптимальной точки инъекции (ОТИ) исследователи проанализировали изображения цитоплазматической мембраны ооцитов с помощью локального бинарного шаблона (ЛБШ). На основании полученных данных была разработана и адаптирована для анализа в режиме "реального времени" система ICSI Position Detector, которая обеспечивала определение ОТИ.

В исследование было включено 917 сиблинговых ооцитов (113 пациенток):

458 - ооцитов с определением ОТИ;

459 - контроль (без определения ОТИ, т.е. "в слепую").

Оплодотворение ооцитов в обеих группах проводилось методом Пьезо-ИКСИ.

Принцип определения ОТИ: А - программа создает изображение ооцита до инъекции; В - на мембране вокруг предполагаемого места инъекции выбирается область для анализа; С - для выбранной области применяется ЛБШ. Было выделено 3 типа паттернов, предсказывающих вероятность НРМ: D, F-"хрупкая" мембрана, высокий риск НРМ; Е-эластичная оболочка, низкий риск НРМ. ОТИ выбиралась на основании анализа этих 3 паттернов. Позиция, в которой было обнаружено скопление паттернов Е (без D и F) обозначалась синим цветом (подходящая точка), и, наоборот, накопление паттернов D и F обозначалось красным цветом (неподходящая точка, высокий риск НРМ). Соответственно, в группе с определением ОТИ инъекции производились в синюю область, а в контрольной группе - "в слепую".

Результаты:

• Уровень НРМ был значительно ниже в группе с определением ОТИ;
• Не отмечалось статистически значимых различий в проценте оплодотворения, образования бластоцист "хорошего" качества, показателях наступления беременности и живорождения (при переносе 1 эмбриона).

Ретроспективно, авторы провели еще одно исследование.

Все ооциты, входящие в контрольную группу (без ОТИ), впоследствии были разделены на 2 подгруппы:

"подходящие", где инъекция "в слепую" была проведена в зону с низкой вероятностью НРМ;

"неподходящие" - инъекция произведена в область с высоким риском НРМ.

Авторы установили, что в группе без выбора ОТИ инъекция в "неподходящую" точку была произведена в 52,5% случаев.

Результаты оплодотворения, культивирования и переноса "подходящей" подгруппы авторы суммировали с результатами группы с определением ОТИ и сравнили с результатами "неподходящей" подгруппы.

Результаты ретроспективного исследования:

• показатель НРМ значительно ниже в "подходящей" группе;
• показатели оплодотворения, формирования бластоцист "хорошего" качества также выше в "подходящей" группе.

Вывод - использование Пьезо-ИКСИ с определением ОТИ снижает частоту НРМ и дегенерации ооцитов.

!!! Но, авторы также указывают на следующие моменты:

◾ в клиниках, имеющих "хорошие" показатели ИКСИ (процент дегенерации ооцитов после ИКСИ - менее 10% (оптимально менее 5%), согласно Венскому консенсусу), внедрение Пьезо-ИКСИ может не дать существенных преимуществ;

◾ для проведения Пьезо-ИКСИ + определение ОТИ требуется больше времени (3 мин), чем для проведения классического ИКСИ (1 мин), что может оказать негативное влияние на ооциты;

◾ авторы не отмечают существенных различий в частоте наступления беременностей и частоте живорождений (на перенос одного эмбриона);

◾ исследование было проведено только в одном центре по лечению бесплодия двумя эмбриологами. Для подтверждения результатов необходимо воспроизвести его в других лабораториях.