Последнее клиническое руководство по Преимплантационному генетическому тестированию (ПГТ) эмбрионов в рамках ВРТ от Американского сообщества репродуктивной медицины (ASRM) проводит анализ различных клинических аспектов проведения ПГТ-А в рамках вспомогательных репродуктивных технологий. К 2024 году накоплены достаточные данные по использованию метода ПГТ, в руководстве предпринята попытка систематизировать различные аспекты, связанные с данной технологией. Мы с вами сконцентрируемся на вопросах безопасности повторного оттаивания, биопсии и замораживания ранее криконсервированных эмбрионов для проведения ПГТ-А, обсудим влияние мужского фактора на уровень хромосомных нарушений у эмбрионов и определимся с методикой ИКСИ при планируемом проведении ПГТ-А.
Итак, приступим. Ниже приведен перевод разделов клинического руководства с ссылками на источники литературы. Приятного прочтения.
Повторное оттаивание, биопсия и замораживание эмбрионов для ПГТ-А.
Пациенты с ранее криоконсервированными небиопсированными эмбрионами могут пожелать разморозить свои эмбрионы для проведения биопсии и тестирования с последующим использованием или повторной криоконсервацией. Причинами для этого могут быть предыдущий выкидыш, обнаружение заболевания, сохранение семьи или желание использовать новую технологию.
Хотя свежая биопсия предпочтительнее, репродуктивные результаты не были значительно ухудшены в отношении частоты имплантации, клинической беременности или биохимических потерь в одном исследовании выживших эуплоидных эмбрионов после последовательности нагревания и оттаивания, биопсии, (ре)витрификации и (ре) оттаивания (1).
Сравнение частоты рождения живых детей в этой группе не проводилось. В одном исследовании было обнаружено, что при втором оттаивании выживаемость была ниже (87,5 % против 98,3 % при первом замораживании и оттаивании, P 0,035), но некоторые эмбрионы были заморожены методом медленной заморозки при первом оттаивании. В отличие от эмбрионов, которые были разморожены для первоначальной биопсии, эмбрионы, размороженные для второй биопсии (т.е. после первоначального «отсутствия считывания», n = 3), не показали хороших результатов; фактически, ни один из них не имплантировался в этом исследовании. В другом исследовании с небольшим объемом выборки (недостаточная мощность) сообщалось, что для бластоцист, которые были разморожены, подвергнуты биопсии и перенесены в течение 2 дней (6-й или 7-й день приема прогестерона), ОР составил 35,3% для возраста менее 35 (n = 17), 40% для возраста 36-44 (n = 16) и 100% для донорской яйцеклетки (n = 2) (2). Некоторым пациентам может быть полезно оттаивание эмбрионов для преимплантационного скрининга, хотя, опять же, они могут ожидать уменьшения количества эмбрионов, доступных для переноса.
По имеющимся данным, неубедительный результат после биопсии для PGT-A бывает в 0,86%-3,8% случаев (3). Вариант повторной биопсии бластоцисты, не давшей результата, требует оттаивания, за которым следует второй раунд биопсии и витрификации. Данные о влиянии нескольких циклов витрификации и биопсии на клинические исходы неоднозначны. В одном ретроспективном когортном исследовании анализировалось влияние 2 циклов витрификации с 1 или более циклами биопсии (4). В этом исследовании были выявлены сопоставимые показатели клинической беременности у эмбрионов, прошедших двойную витрификацию с одной биопсией (44 %), и у контрольных эмбрионов, прошедших одинарную витрификацию и одну биопсию (46 %). Однако в группе с двойной витрификацией и двойной биопсией наблюдалась тенденция к снижению частоты наступления клинической беременности (35 %), которая не была статистически значимой. Эти результаты были подтверждены другой группой (5), которая отметила отрицательный эффект двойной витрификации и двойной биопсии.
Третья группа выявила, что у эмбрионов, прошедших 2 витрификации и 1 биопсию (n = 3 452), частота наступления беременности и клинических потерь составила 63,2% и 9,8%, соответственно, по сравнению с 50% и 21,7% у эмбрионов, прошедших двойную витрификацию и двойную биопсию (n = 36) (P = 0,08) (6). Это было подтверждено другой исследовательской группой, которая обнаружила, что эмбрионы, прошедшие двойную витрификацию и двойную биопсию, имели значительно меньший процент клинической беременности (31% против 54,3%) по сравнению с эмбрионами, прошедшими одинарную витрификацию и одинарную биопсию (P = 0,13) (7). С другой стороны, в двух исследованиях было установлено, что бластоцисты могут переносить второй раунд биопсии без ущерба для клинической беременности и живорождения (3, 8).
Хотя данные неоднозначны, представляется, что по крайней мере несколько циклов витрификации и биопсии могут повлиять на имплантацию эуплоидных бластоцист, и это должно быть соотнесено с необходимостью получения результата PGT-A.
1. Taylor TH, Patrick JL, Gitlin SA, Michael Wilson J, Crain JL, Griffin DK. Outcomes of blastocysts biopsied and vitrified once versus those cryopreserved twice for euploid blastocyst transfer. Reprod Biomed Online 2014;29:59–64.
2. Liu M, Su Y, Wang WH. Assessment of clinical application of preimplantation genetic screening on cryopreserved human blastocysts. Reprod Biol Endocrinol 2016;14:16.
3. Cimadomo D, Rienzi L, Romanelli V, Alviggi E, Levi-Setti PE, Albani E, et al. Inconclusive chromosomal assessment after blastocyst biopsy: prevalence, causative factors and outcomes after re-biopsy and re-vitrification. A multi- center experience. Hum Reprod 2018;33:1839–46.
4. De Vos A, Van Landuyt L, De Rycke M, Verdyck P, Verheyen G, Buysse A, et al. Multiple vitrification-warming and biopsy procedures on human embryos: clinical outcome and neonatal follow-up of children. Hum Reprod 2020;35:2488–96.
5. Parriego M, Coll L, Vidal F, Boada M, Devesa M, Coroleu B, et al. Inconclu- sive results in preimplantation genetic testing: go for a second biopsy? Gynecol Endocrinol 2019;35:90–2.
6. Neal SA, Sun L, Jalas C, Morin SJ, Molinaro TA, Scott RT Jr. When next- generation sequencing-based preimplantation genetic testing for aneu- ploidy (PGT-A) yields an inconclusive report: diagnostic results and clinical outcomes after re biopsy. J Assist Reprod Genet 2019;36:2103–9.
7. Bradley CK, Livingstone M, Traversa MV, McArthur SJ. Impact of multiple blastocyst biopsy and vitrification-warming procedures on pregnancy out- comes. Fertil Steril 2017;108:999–1006.
8. Zhang S, Tan K, Gong F, Gu Y, Tan Y, Lu C, et al. Blastocysts can be rebiopsied for preimplantation genetic diagnosis and screening. Fertil Steril 2014; 102:1641–5.