Новые результаты исследования ESHRE по оценке эуплоидии ооцитов с помощью анализа микрочипов (ESTEEM) показали, что кроме аномальной сегрегации хромосом, есть и другие механизмы, которые могут вызывать ошибки во время мейоза.
Чем старше женщина, тем выше риск того, что ее эмбрионы будут иметь множественные хромосомные аномалии. При этом широко распространено мнение, что эти ошибки вызваны исключительно неправильной сегрегацией хромосом на обоих этапах деления клеток в мейозе.
Однако это мнение было опровергнуто авторами многоцентрового РКИ, которые утверждают, что необходимо учитывать и другие факторы. Благодаря тщательному хромосомному анализу большого количества полярных тел (ПТ), их исследование предоставляет доказательства частой неожиданной сегрегации хромосом во время оогенеза. Оно также позволяет лучше понять влияние хромосомных аномалий, присутствующих в ооците, на развитие эмбриона.
Результаты исследования, основанные на данных, полученных в ходе испытания ESTEEM, представляют собой один из крупнейших анализов такого рода и углубляют понимание причин низкой частоты беременностей, потерь беременности и врожденных дефектов у женщин позднего материнского возраста (ПМВ).
В своей недавно опубликованной работе авторы пишут, что полученные ими результаты свидетельствуют о том, что знания о механизмах, вызывающих анеуплоидию в ооцитах, "являются неполными". Далее они заявляют, что их выводы о количестве копий "ставят под сомнение догмы о том, что анеуплоидия в ооцитах вызвана исключительно неправильной сегрегацией хромосом во время MI (мейоза I) и MII (мейоза II)".
На сегодняшний день мало изучены механизмы, лежащие в основе возникновения аномального числа хромосом во время мейоза у женщин. Исследования, в которых изучался этот вопрос, включали для анализа лишь небольшое количество пар ПТ.
Оригинальное исследование ESTEEM проводилось в семи европейских центрах с целью выяснить, повышает ли генетическое тестирование на анеуплоидию (PGT-A) путем скрининга обоих ПТ с помощью сравнительной геномной гибридизации массива шансы на рождение живого ребенка у пациенток ИКСИ в возрасте от 36 до 40 лет по сравнению с ИКСИ без PGT-A.
В настоящем исследовании была проведена повторная оценка данных ESTEEM на основе 693 пар ПТ от 396 женщин позднего материнского возраста (ПМВ) (n=205 группа вмешательства PGT-A; n=191 контроль). Это было сделано для того, чтобы охарактеризовать типы хромосомных аномалий и наиболее часто встречающиеся хромосомы.
Кроме того, целью было определить, какие процессы происходят в ооцитах пациенток ПМВ, вызывая анеуплоидию, и оценить любую корреляцию с качеством эмбрионов.
Для статистического анализа были использованы морфологические данные 1 034 эмбрионов, полученных из оплодотворенных ооцитов (два пронуклеуса) в группе биопсии ПТ и 1082 эмбрионов в контрольной группе.
Результаты показали, что более двух третей (n=461/693) пар ПТ показали аномальную сегрегацию в 1 162 из 10 810 хромосом.
Из этих аномальных сегрегаций большинство (n=1 050/1 162; 90 %) были известными ошибками сегрегации. Почти половина из них была совместима с преждевременным разделением сестринских хроматид в MI (n=568/1 162; 48,9 %), более трети - с нерасщеплением (ND) хроматид в MII или обратной сегрегацией (n=417/1 162; 35,9 %), и реже ND в MI (n=65/1 162; 5,6 %).
Однако, по словам авторов, неизвестные ошибки были выявлены в 10 % хромосом (n=112/1 162) с аномальной сегрегацией ПТ. В этих случаях, по их словам, наблюдалось такое число копий (хромосом) в первой и второй ПТ, которое не могло быть объяснено "ни одним из известных механизмов, вызывающих анеуплоидию в ооцитах".
Авторы предполагают, что премейотическая анеуплоидия может объяснить полученные ими результаты; или, в качестве альтернативы, могло произойти отставание в анафазе.
Эмбрионы в группе PGT-A, участвовавшей в РКИ, не имели значительных различий в морфологии между 2 и 6 днями после оплодотворения по сравнению с контрольной группой. Таким образом, это указывает на то, что биопсия ПТ не повлияла на качество эмбрионов.
Анализ с поправкой на возраст проводился для каждого дня оценки эмбрионов. Результаты показали, что анеуплоидия была связана со снижением качества эмбрионов на 3-й день (скорректированное отношение шансов (aOR) 0,62, 95% CI 0,43-0,90), 4-й день (aOR 0,15, 95% CI 0,06-0,39) и 5-й день (aOR 0,28, 95% CI 0,14-0,58). Это новый результат, который показывает, что развитие эмбриона и хромосомный статус ооцита взаимосвязаны; и он не является предвзятым, в отличие от отбора эмбрионов для биопсии, говорят авторы.
К ограничениям исследования относится тот факт, что оно проводилось в нескольких лабораториях и отделениях ЭКО. Как следствие, интерпретация результатов в разных центрах могла отличаться.
Анализ анеуплоидии ооцитов мог быть проведен только косвенно с помощью ПТ-теста, поскольку ооцит/эмбрион был недоступен для подтверждения ожидаемых сегрегаций.
Авторы говорят, что "значительное количество" проанализированных ПТ позволило им не только обнаружить неожиданные типы хромосомной сегрегации, но и лучше понять влияние аномального мейоза на развитие эмбриона.
Это понимание, добавляют они, может привести к разработке стратегий вмешательства, которые в будущем смогут "смягчить эти пагубные последствия" и снизить риск их возникновения.