Новые подходы, позволяющие проводить раннюю диагностику и мониторинг лечения как вируса иммунодефицита человека-1 (ВИЧ-1), так и туберкулеза (ТБ), необходимы для улучшения результатов лечения пациентов.
Методы
Мы разработали и валидировали иммуноаффинный жидкостной хроматографо-тандемный масс-спектрометрический анализ (ILM), позволяющий одновременно количественно определять отдельные пептиды, полученные из ВИЧ-1 p24 и белка культурального фильтрата микобактерий туберкулеза (Mtb) 10-kDa (CFP10) в трипсинизированной сыворотке, полученной из криоконсервированных архивов сывороток крови когорт взрослых и детей с/без ВИЧ и туберкулеза.
Результаты
Результаты ILM p24 и CFP10 продемонстрировали хорошую внутрилабораторную точность и достоверность: значения коэффициентов восстановимости составили от 96,7 до 104,6% и от 88,2 до 111,0%, общая внутрилабораторная точность (CV) - от 5,68 до 13,25% и от 10,36 до 14,92%, хорошая линейность (r2 > 0,99) - от 1,0 до 256,0 пмоль/л и от 0,016 до 16,000 пмоль/л, соответственно. В когортах взрослых (n = 34) и детей (n = 17) с ВИЧ и/или ТБ выявленные с помощью ILM p24 и CFP10 продемонстрировали 85,7 - 88,9 % и 88,9 - 100,0 % диагностической чувствительности для ВИЧ-1 и ТБ при 100 % специфичности для обоих случаев и выявили ВИЧ-1 инфекцию раньше, чем 3 коммерческих иммуноферментных анализа антиген/антитело p24. Наконец, значения p24 и CFP10, измеренные лонгитюдно в образцах сывороток крови детей с ВИЧ-1 и ТБ, отличали лиц, ответивших на лечение ТБ, от тех, кто не ответил или не лечился, и у кого развился воспалительный синдром восстановления иммунитета при ТБ.
Выводы
Одновременная оценка результатов p24 и CFP10 в ILM может позволить выявлять ТБ и ВИЧ на ранних стадиях и предоставлять ценную информацию о реакции на лечение для облегчения интеграции диагностики и лечения ТБ и ВИЧ.