В соответствии с европейскими рекомендациями, качественная работа с тканями и клетками - залог безопасности для пациентов.
Возникает новая проблема - растущее количество замороженных образцов и ограничение места хранения. Новый стандарт заморозки - один ооцит или эмбрион на криотоп ведёт к быстрому использованию ёмкости дъюара.
КРИОКОНСЕРВАЦИЯ, как процедура, оценивающая стандарт высокого качества лаборатории ВРТ
Безопасность краткосрочного и длительного хранения
Процент рисков, связанных с работой с замороженных материалом, достаточно тяжело установить. Основной риск - это разморозка материала вследствие некачественного азота, неполадки с оборудованием или ненадлежащем перемещением. Последнее может возникнуть даже просто при поиске нужного образца при перемещении из хранилища в другую емкость. Могут быть и непредвиденные факторы риска, связанные с персоналом, которые не следуют чётким правилам протоколов.
Длительное хранение человеческих гамет, эмбрионов, тканей яичников или яичек в настоящее время используется как по медицинским, так и по не медицинским показаниям, например, у пациентов, столкнушихся с гонадотоксическим лечением, женщин, планирующих отложенное материнство и т.д. Несмотря на убеждение, что длительное хранение останавливает метаболизм и старение, существуют спорные результаты, и некоторые авторы говорят о предполагаемой негативном влиянии длительного хранения. Кроме того, длительное воздействие криопротекторов может оказать токсический эффект, а потенциальное загрязнение жидкого азота может оказать пагубное влияние.
Было опубликовано много статей на тему отсутствия негативного влияния длительного хранения на клетки.
Хотя последнее крупное исследование сообщило о рождении здоровых детей, появившихся в результате использования замороженного материала.
Риски, связанные с жидким азотом
Витфикация считается "золотым" стандартом заморозки как для ооцитв, так и для эмбрионов. Протоколы заморозки используют как Открытые, так и закрытые носители. Если в закрытых не происходит контакта с жидким азотом, то в открытых он есть.
Следует отметить, что некоторые микроорганизмы могут существовать в условиях жидкого азота. Бактерии гораздо устойчивее к воздействию низкиз температур, по сравнению, с грибами. Так, например, криоконсервация снижает содержание грибов в сперме на 90%. Интересно, что выделенные бактерии являются условно-патогенными, и не несут какой-либо опасности для человека илм животных.
Несмотря на отсутствие подтверждений о перекрёстном заражении образцов, настоятельно рекомендуется образцы вирусоносителей обрабатывать в отдельной лаборатории.
Поскольку ВИЧ, вирусы гепатита С и В, возможно, другие вирусы могут выживать в условиях жидкого азота - перекрестное заражение не может быть исключено. Для таких образцов рекомендовано рассмотреть возможность их хранения в парах жидкого азота, а не в жидкой его части.
Риски, связанные с перемещением материала:
Считается, что большинство ошибок при криохранении происходит в результате неисправности оборудования или перебоев в подаче жидкого азота. Чтобы свести к минимум такие риски, рекомендуется регулярно проводить техническое обслуживание резервуаров и осуществлять ежедневный, и даже непрерывный мониторинг на предмет утечки азота. Клиники должны иметь дополнительный запас азота на случай проблем с поставками. Также на случай неисправности дьюара должен быть дополнительный. Рекомендуется хранить образцы от одной пары в разных резервуарах на тот случай, если один резервуар сломается.
Многократные инвентаризации образцов могут негативно сказываться на замороженных материале.
Клиникам ЭКО рекомендуется пересмотреть системы контроля:
- непрерывный электронный мониторинг температуры резервуара и уровня жидкого азота
- системы сигнализации для резервуаров с возможностью уведомления
- подробный план действий в случае непредвиденных обстоятельств
ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСУЛЖИВАНИЕ ДЬЮАРОВ И РЕЗЕРВУАРОВ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ:
Транспортные резервуары малой ёмкости обычно используются для перемещения образцов внутри клиники или между клиниками. Как правило, это сосуды с двойными стенками из алюминия, с горловиной из композитного стекловолокна.
Новый сосуд должен быть осмотрен на предмет повреждений, а затем очищен по стандарту процедуры очистки. Перед наполнением, необходимо взвесить сосуд. После наполнения проводят повторный взвес через 2 часа с целью исключения повреждения сосуда.
Ежегодная, а лучше ежемесячная поверка технического состояния должна включать скорость испарения азота.
ОЧИСТКА сосудов для короткоо и длительного хранения
Ожидаемый срок службы дьюаров 10 лет. Использование сосудов должно проходить строго в соответствии с инструкцией. Неправильное обращение может привести к косвенному повреждению образцов.
Очистка должна проводиться только разрешенными чистящими средствами, хорошо промываться и высушиваться.
Персонал должен быть чётко проинструктирован на тему сохранности сосудов, их использования, очистки, а также рекомендовано проводить периодические испытания для сотрудников с моделированием чрезвычайной ситуации.
ТРАНСПОРТИРОВКА замороженных образцов
В клинической практике пациенты часто перевозят материал между клиниками и, безусловно, это может негативно сказаться на качестве их биоматерила. Поэтому одно из главных правил - брать письменное информирмированое согласие о рисках.
Большинство экспертов сходятся во мнении, что профессиональные курьерские службы являются самым безопасным средством транспортировки.
РЕПРОДУКТИВНЫЕ ИСХОДЫ при использовании криоконсервированного материала
Появление витрификации поменяло правила игры: хорошие показатели жизнеспособности после оттаивания, а также возможностью переноса 1го эмбриона. С помощью стратегии freeze-all удалось снизить риск развития СГЯ.
Что касается здоровья детей, данные ограничены, требуют дополнительные данные.
АВТОМАТИЗАЦИЯ БУДУЩЕГО
Чтобы максимально контролировать важные переменные в процессе витрификации, включая температуру, положение эмбриона, объем среды и т.д., была предложена автоматическая витрификация. Несмотря на это, автоматизированная витрификация может привести к увеличению времени обработки и даже необязательно к повышению эффективности. Роботизированные системы и микрофлюидные платформы в настоящее время разрабатываются и продаются, но остаются клинически непроверенными.
Автоматизация может уменьшить число инцидентов, таких как неправильная идентификация пациентов, неправильное размещение или потеря репродуктивного материала.
ВЫВОДЫ:
Несмотря на усовершествование всех процессов, мы сталкиваемся с накоплением криоконсервированного материала. Это усложняет процессы контроля, увеличивает шанс на ошибку.
Внедрение автоматизированных систем может помочь снизить риски, связанные с хранением, а также с нарушением идентификации материала.
В любом случае нашей основной целью остаётся безопасность и качественная идентификация образцов во избежание наступления катастрофических событий.