Для бактериологических исследований наиболее важны следующие свойства агара: он не разрушается ферментами большинства видов бактерий, агаровые гели устойчивы к температурам до 65 °С или выше, расплавленный агар не превращается в гель, пока не охладится почти до 40°С, и, наконец, агаровые гели имеют высокую степень прозрачности.
Для приготовления твердой агаровой среды вначале доводят рН основной жидкой среды до желаемой величины и затем добавляют гранулированный агар. Бактериологический агар или агар более высоких сортов незначительно изменяет рН среды. Для получения твердой среды используют 15-20 г агара на 1 л, а полужидкой- 1,5-4 г/л в зависимости от требуемой концентрации. Для получения среды определенной степени твердости требуются разные концентрации различных марок и сортов агара, поэтому необходимо всегда руководствоваться инструкциями фирмы-изготовителя.
Приготовление сред с агаром
После добавления агара к основной жидкой среде смесь нагревают до кипения, чтобы полностью растворить агар. Если нагрев производится над пламенем или на горячей плите, среду постоянно мешают в течение нагревания, чтобы не допускать осаждения агара на дно, где он может карамелизоваться и обуглиться. Дают среде покипеть приблизительно 1 мин; при этом следят, чтобы агар не вспенивался и не выплескивался через край. Агар можно также растворить на пару или в микроволновой печи в течение определенного времени. После того как агар растворится, его размешивают для получения равномерной концентрации во всей среде. Расплавленную среду разливают в пробирки, колбы или бутыли и стерилизуют в автоклаве.
Для предохранения чашек с агаром от чрезмерного высыхания их помещают в закрытые полиэтиленовые мешки (для этой цели пригодны мешки, в которые обычно запаковывают пластмассовые чашки Петри). Чашки со средой хранят в таких условиях при комнатной температуре в течение 4-5 нед.
Все жидкие и твердые среды следует хранить в темной комнате или шкафу. Хранение чашек со средами на свету, особенно солнечном, например возле окна, может привести к фотохимическому образованию перекиси водорода или других токсичных форм соединений кислорода, что способствует иногда ингибированию роста бактерий. Особенно чувствительными в этом отношении оказались микроаэрофилы.