✅ВОПРОС ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ: Какие клинические и лабораторные различия возникают при параллельном прямом сравнении эмбрионов, достигших стадии бластоцисты между 4, 5, 6 и 7 днями (4–7 дни)?
✅ЧТО УЖЕ ИЗВЕСТНО: В сфере вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), мировой опыт указывает на то, что 40–60% зигот человека с 2мя пронуклеусами (2PN) превращаются в бластоцисты к 5му дню развития. Однако человеческий эмбрион наделен большой "морфокинетической гибкостью", так как на практике он может достигать стадии бластоцисты в любое время между 4 и 7 днями. Если использование бластоцист 6го дня дополнительно к 5суточным бластоцистам стало рутинной практикой, несколько недавних исследований также подчеркнули возможность использования клинического потенциала бластоцист 7-го дня. В данном исследовании мы сравнили бластоцисты 4,5, 6 и 7 дня параллельно, оценивая как морфокинетические, так и клинические результаты.
✅ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ, РАЗМЕР, ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ: ретроспективное исследование, покадровый мониторинг (time-lapse инкубатор) бластоцист на 4-й день (N = 70), 5-й день (N = 6147), 6-й день (N = 3243) и 7-й день (N = 149), 9450 циклов ИКСИ. Забор яйцеклеток проводился после минимальной стимуляции яичников на основе кломифена цитрата в период с января 2020 года по апрель 2021 года, клиника Като, Токио, Япония
✅ОЦЕНКА РАЗВИТИЯ ЭМБРИОНОВ: Изображения снимались каждые 10 минут в 11 фокальных плоскостях. Были зафиксированы и проанализированы моменты времени наступления следующих событий: исчезновение пронуклеусов (tPNf), начало 2-клеточной (t2), 3-клеточной (t3), 4-клеточной (t4), 5-клеточной(t5), 6-клеточной (t6), 7-клеточной (t7) и 8-клеточной (t8) стадии, начало компактизации (tSC), завершение процесса компактизации (тМ), инициации бластуляции (тСБ), и формирование полных (tB) и экспандированных (tEB) бластоцист (ESHRE Рабочая группа по технологии замедленной съемки и др., 2020). Временные интервалы (TI) рассчитывались между каждым событием.
✅❗️РЕЗУЛЬТАТЫ❗️
🔸 Морфология и морфокинетика
▶️Среднее время развития экспандированных бластоцист составило 98,4±0,4, 112,4 ± 0,1, 131,6 ± 0,1 и 151,2 ± 0,5 ч в День 4–7 соответственно
▶️Возраст матери, возраст отца и количество предыдущих циклов имели положительную корреляцию с более длительным временем формирования бластоцисты
▶️Показатели внутренней клеточной массы (ICM) и трофэктодермы (TE) у бластоцист класса А имели отрицательную корреляцию с днем развития бластоцисты
▶️Различия в скорости развития и связанных с этим временных интервалах увеличивались постепенно до момента экспансии бластоцисты, такие различия проявляются уже с момента исчезновения пронуклеусов
▶️Продолжительность интервала между исчезновением пронуклеусов и первым делением, хотя и охватывает лишь приблизительно 2 ч, также было связана с днем формирования бластоцисты. Примечательно, что временной интервал t4–t5* был единственным, в котором не наблюдалось задержек в развитии эмбрионов в группах «День 6» и «День 7»
* интервал t4–t5 отражает начало первого дробления третьего раунда клеточных делений (от 5-клеточной до 8-клеточной стадии)
▶️Частота аномалий дробления (три-/мультихотомический митоз или быстрое дробление), происходящих при первом или втором/третьем делении также были положительно связаны с более длительным временем формирования бластоцисты
▶️Скорость развития эмбрионов, остановившихся впоследствии в развитии, была ниже по сравнению с бластоцистами 4–6-го дня, однако она была немного быстрее, чем у бластоцист 7-го дня
▶️Частота аномалий дробления, возникающих в первом или втором/третьем циклах деления, была относительно выше у остановившихся в развитии эмбрионов, чем у эмбрионов, достигших стадии экспандированной бластоцисты
🔸 Беременность и роды
▶️Частота имплантации, клинической и продолжающейся беременности, а также живорождения была значительно снижена при переносе бластоцист 6го дня по сравнению с бластоцистами 5го дня
🔸 Неонатальные исходы
▶️Количество живорождений:
- бластоцисты 4го дня - 23
- бластоцисты 5го дня - 1400
- бластоцисты 6го дня - 242
- бластоцисты 7го дня - 3
▶️Сравнение таких показателей, как длина, вес при рождении, низкий вес при рождении, врожденные пороки развития, не выявило существенных различий между группами
✅ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Наши данные указывают на то, что временные различия в формировании бластоцист 4–7 дней происходят уже на пронуклеарной стадии, что, возможно, продиктовано внутренними факторами клеточного происхождения. Это еще раз подчеркивает основополагающую роль этапа оплодотворения в развитии человеческого эмбриона