Найти тему

UHPLC за или против

Ультрабыстрая высокоэффективная хроматография (Ultra High Performance Liquid Chromatography UHPLC) способна уменьшить потребление количества подвижной фазы, образца, уменьшить время анализа в несколько раз:

Условия: поток 1,0мл/мин, колонка L1 150x4.6mm 5мкм
Условия: поток 1,0мл/мин, колонка L1 150x4.6mm 5мкм

Условия: поток 0,5 мл/мин, колонка L1 100x3,0mm 1,8мкм
Условия: поток 0,5 мл/мин, колонка L1 100x3,0mm 1,8мкм

Казалось бы, что может быть лучше и эффективнее для лаборатории, но как всегда есть несколько но...

1) Для перехода от HPLC к UHPLC необходимо оснащение специализированным оборудованием (а именно хроматограф с поддержанием давления свыше 1000 бар);

2) Колонки для ультрабыстрой хроматографии менее 100мм размером частиц менее 2 мкм;

3) Фильтры диаметром пор не более 0,22мкм (как для фильтрации подвижной фазы, так и для образцов);

-3

4) Качество реактивов должно соответствовать грейду ULTRA (данным пунктом нельзя пренебрегать, ниже фото демонстрирующие что будет если использовать недочищенную соль)

-4

5) Правильная сборка прибора и установка колонки. (наименьшее расстояние от колонки до детектора);

6) Своевременная отмывка прибора до и после анализа (если этого не делать смотри фото в пункте 4).

Таким образом, из-за "капризности" данного метода, он так и не нашел широкое распространение в аналитике.

В защиту UHPLC хочу сказать вот что, отработав и отвалидировав такие методики нам удалось сократить время анализа с 6 часов до 45 минут, в рутином контроле или контроле очистки оборудования данный метод обеспечит оперативный контроль, с минимальными затратами реактивов. Изначально не всё было гладко, забивались капилляры, ломались фитинги, приходилось постоянно писать инженерам, не только по работе с прибором, но и по нюансам эксплуатации колонки. Теперь же проблемы возникают крайне редко и методы с UHPLC плотно прижились в нашей практике.