Американские офтальмологи опубликовали результаты первой фазы испытаний терапии лимбальными стволовыми клетками после ожогов роговицы. Врачи брали биопсию из области лимба со здоровых глаз четырех пациентов, создавали в лаборатории трансплантат на основе лимбальных стволовых клеток и пересаживали его в роговицу на больном глазу. У всех участников исследования трансплантация прошла без тяжелых побочных эффектов. У двоих пациентов после операции закрылись длительно существующие язвы роговицы, но лишь у троих пациентов из четырех зрение улучшилось после трансплантации. Создание протокола культивации клеток в лаборатории позволит чаще использовать клеточную терапию в лечении лимбальной недостаточности. Результаты опубликованы в Science Advances.
Человеческая роговица медленно и не полностью регенерирует после инфекций и травм. Причина тому — низкая пролиферативная активность клеток, образующих слои роговицы. Лучше всего делятся клетки в составе лимба — это утолщение фиброзной оболочки глаза, отделяющее роговицу от склеры. Если из-за ожога или воздействия яда их активность падает (возникает лимбальная недостаточность), то после повреждений легче возникают незаживающие язвы роговицы, в прозрачную оболочку глаза легче прорастают сосуды из склеры, и даже трансплантация роговицы часто не решает проблему, поскольку трансплантат быстро мутнеет.
В конце XX века начались попытки лечения лимбальной недостаточности стволовыми клетками, полученными из лимба пациента, из лимба донора или из любых других клеток путем трансдифференцировки. Несмотря на неплохие результаты, лимбальные стволовые клетки не получили распространения — ведь технология их культивации не была стандартизована, а без четко прописанной и унифицированной технологии невозможно сертифицировать и массово производить лекарство.
Офтальмологи из Гарвардской медицинской школы во главе с Улой Юркунас (Ula V. Jurkunas) представили результаты исследования первой фазы, в котором оценивалась возможность и безопасность терапии аутологичными лимбальными стволовыми клетками. Врачи включили в исследование пятерых пациентов с тяжелыми последствиями односторонних химических ожогов роговицы.
У пациентов брали биоптат лимба со здорового глаза размером примерно 3,1 на 2,5 миллиметра (дефекты роговицы такого размера заживали в течение четырех недель без серьезных осложнений). Врачи отправляли биоптат в лабораторию, где в контролируемых условиях выращивали клетки в жидкой питательной среде на подложке из амниотической мембраны. На создание трансплантата уходило 13-22 дня, в течение которых проводился контроль среды на наличие инфекционных агентов, а клеток — на жизнеспособность. Затем клетки на амниотической мембране трансплантировали пациентам в пораженную роговицу.
Из биоптата от одного пациента не удалось вырастить стволовые клетки, поэтому он был исключен из исследования. У трех из четырех пациентов, получивших стволовые клетки, острота зрения улучшилась спустя спустя год наблюдения. Во всех случаях врачи отметили уменьшение выраженности неоваскуляризации роговицы, а у пациентов, у которых до начала лечения были язвы роговицы, произошла их эпителизация. Тем не менее, исследователи пишут, что двум пациентам, участвовавшим в исследовании, планируется пересадка роговицы, поскольку качество зрения после лечения стволовыми клетками все еще недостаточно.
Предлагаемая американскими врачами процедура трансплантации содержит не только протокол проведения процедуры, но и описание условий забора клеток, среды для их культивации и описание технологии контроля качества трансплантата. По утверждению врачей, такую технологическую цепочку можно наладить в любой лаборатории, сертифицированной по стандартам cGMP, что позволит быстро начать выполнять трансплантации лимбальных стволовых клеток в разных лабораториях по всему миру. Впрочем, сначала методика должна пройти необходимые фазы исследования на людях. А с этим пока не все гладко: изначально группа Юркунас планировала набрать в исследование 17 пациентов, но набор даже пятерых участников растянулся на семь лет.
Для восстановления зрения ученые используют не только клеточную терапию, но и генную. Технологии нейростимуляции тоже постепенно проникают в офтальмологию — по крайней мере, в рамках экспериментов.