Ревматоидный артрит (РА) представляет собой аутоиммунное заболевание, характеризующееся поражением суставов. Клинические исходы у пациентов с активным РА можно улучшить с помощью противоревматических препаратов, таких как метотрексат (МТ). Многие врачи полагаются на метотрексат, чтобы уменьшить деструктивное повреждение суставов и функциональную нетрудоспособность, характерную для РА. Хотя препарат является антагонистом фолиевой кислоты, точные механизмы его действия у пациентов с РА в значительной степени неизвестны.
Предыдущие исследования показывают, что метотрексат также влияет на тип лейкоцитов, называемый CD4 + T-клетками. Считается, что эти клетки играют роль в развитии РА, в частности, в балансе между активацией интерлейкин-17-продуцирующих хелперных Т-клеток (Th17) и CD4 + регуляторных Т-клеток (Treg). Исследователи считают, что метотрексат влияет на CD4 + T-клетки, подавляя активность T-клеток и увеличивая количество Treg-клеток, но его специфические эффекты, помимо метаболизма фолиевой кислоты, остаются неясными.
Недавно группа исследователей обнаружила, что метотрексат нацелен на опухолевый белок р63 (ТР63) в CD4 + Т-клетках. Их выводы были опубликованы в научном журнале JCI Insight.
Команду ученых возглавил доктор Акиро Суто (Akiro Suto), научный сотрудник кафедры аллергии и клинической иммунологии Высшей школы медицины Университета Тиба (Graduate School of Medicine, Chiba University) и Института перспективных академических исследований Университета Тиба (Institute for Advanced Academic Research at Chiba University).
«Мы стремились профилировать экспрессию генов до и после лечения метотрексатом, поскольку препарат, вероятно, нацелен на CD4 + Т-клетки, и мало что известно о его влиянии на экспрессию генов у пациентов с активным РА», — объясняет доктор Суто, обсуждая мотивацию группы к продолжению исследования.
Исследователи использовали профилирование ДНК-микрочипов CD4 + Т-клеток человека от пациентов с РА, чтобы понять, как метотрексат влияет на экспрессию генов. Ученые также использовали нокдаун гена — молекулярный метод подавления гена-мишени — и секвенирование РНК (RNA-Seq) для проверки функции гена. Исследователи обнаружили, что TAp63, изоформа белка TP63, сильно экспрессируется в клетках Th17 человека и мыши.
Доктор Суто комментирует: «Пациенты, получавшие лечение метотрексатом, имели значительно более низкую экспрессию матричной РНК TAp63 в своих CD4 + T-клетках. MTX также подавлял белки TAp63 в клетках Th17 человека и мыши. Супрессия TAp63 в клетках Th17 мыши приводила к улучшению аутоиммунного артрита у мышей».
Данные RNA-Seq и нокдауна гена показали, что другой ген, FOXP3, главный регулятор клеток Treg, стал мишенью для TAp63. Когда TAp63 был «нокаутирован» в клетках Treg, экспрессия белка Foxp3 увеличивалась. Проведя анализ, исследователи подтвердили, что TAp63 связывается с энхансером FOXP3 и подавляет его.
Вместе эти данные свидетельствуют о том, что TAp63 неразрывно связан с балансом дифференцировки клеток Th17 и Treg. Таким образом, ингибирование TAp63 может усиливать супрессивную функцию Treg-клеток и ограничивать аутоиммунный ревматоидный артрит.
Эти данные раскрывают надежный механизм действия метотрексата и показывают, как клетки Treg могут сохраняться при ревматоидном артрите. Они также демонстрируют потенциал TAp63 в качестве новой терапевтической мишени для РА.
Статья по теме: Лечение ревматоидного артрита метотрексатом и фолиевой кислотой.