Криконсервация ткани яичника- витрификация или медленное замораживание?
Систематический обзор и метаанализ cравнения эффективности по результатам гистологического исследования
Два распространенных метода криоконсервации ткани яичника включают витрификацию (быстрая заморозка) и медленное замраживание. 👉При витрификации исключается образование кристаллов льда и тем самым внутриклеточное механическое повреждение путем быстрой конверсии клеток из жидкого состояния в стеклообразное
👉Медленное замораживание охлаждает образцы с контролируемой скоростью, но может привести к внеклеточному повреждению при переходе клеток из водной фазы в твердую, включая образование кристаллов льда
🔹 ЦЕЛЬ МЕТААНАЛИЗА: систематически оценить гистологические результаты витрификации по сравнению с медленным замораживанием ткани яичника,чтобы обеспечить соответствующую информацию для лабораторной и институциональной практики в вопросе криоконсервации ткани яичника
🔹 МЕТОДЫ: Был проведен систематический обзор литературы по руководству ПРИЗМА- PubMed, Embase, Scopus и Web of Science, опубликованной в период с января 2005 по январь 2022, 19 исследований
Критерии сравнительной оценки:
- % интактных примордиальных фолликулов (интактные примордиальные фолликулы по отношению ко всем примордиальным фолликулам)
- % интактных стромальных клеток (интактные стромальные клетки по отношению ко всем стромальными клеткам)
- % фрагментации ДНК в примордиальных фолликулах (примордиальные фолликулы с признаками фрагментации ДНК к числу всех примордиальных фолликулов)
- средняя плотность примордиальных фолликулов в ткани
- выработка эстрадиола
🔹 ❗ РЕЗУЛЬТАТЫ❗ :
✔ % интактных примордиальных фолликулов- не было значительной разницы между витрификацией и медленным замораживанием
✔ % интактных стромальных клеток- выше в витрифицированной ткани
✔ % фрагментации ДНК в примордиальных фолликулах- не было значительной разницы между витрификацией и медленным замораживанием
✔ средняя плотность примордиальных фолликулов в ткани- не было значительной разницы между витрификацией и медленным замораживанием
✔ выработка эстрадиола- недостаточно данных для метаанализа
❗️ПО ВСЕМ КРИТЕРИЯМ ОТМЕЧАЛАСЬ ЗНАЧИТЕЛЬНАЯ ГЕТЕРОГЕННОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ
🔹 ОБСУЖДЕНИЕ:
За счет использования криопротекторов и обезвоживания клеток, витрификация предотвращает образование кристаллов льда. Как проникающие, так и непроникающие криопротекторы используются при витрификации, что сводит в общем к минимуму физическое повреждение клеток. Это может помочь объяснить результаты этого метаанализа, который выявил более высокую жизнеспособность стромальных клеток при заморозке ткани яичника методом витрификации.
Хотя это исследование онаружило некоторое преимущество использования метода витрификации вместо медленного замораживания, существует несколько основных практических различий между 2 методами, которые могут оказаться полезным в лаборатории:
- медленное замораживание имеет низкий потенциал контаминации патогенными агентами и требует меньше навыков для проведения
- при медленной заморозке обеспечивается меньший риск токсичности за счет криопротекторов
Будущие исследования, сравнивающие витрификацию с медленным замораживанием ткани яичника, должны использовать стандартизированный протокол как витрификации, так и медленного замораживания для уменьшения неоднородности исследований