По данным исследовательской группы эмбриологов ESHRE (2017 г.), 20-35% яйцеклеток не оплодотворяются после проведения процедур ЭКО/ИКСИ.
Большая часть причин, в основе которых лежат нарушения, связанные со сперматозоидами, решается с помощью ИКСИ.
Наиболее распространенной причиной отсутствия оплодотворения после ИКСИ является недостаточная активация ооцитов. Процесс активации яйцеклетки опосредован специфичным для сперматозоидов ферментом - фосфолипазой C z (PLC z), который вызывает колебания концентрации Ca 2+ в цитоплазме ооцита, что является первым шагом на пути к успешному оплодотворению.
У пациентов с дефицитом или дефектами PLC z обнаружены множественные мутации в гене PLC z1, что приводит к низкому проценту оплодотворения из-за недостаточной активации ооцитов (OAD).
Однако в настоящее время не существует клинически валидированных тест-систем, для определения количества PLC z и его активационного потенциала.
Искусственная (АОА) является эффективным методом лечения OAD и актуальна для пациентов с неожиданно низким процентом оплодотворения (ULF) и/или полным отсутствием оплодотворения (TFF).
Методика АОА подразумевает введение стимулятора (ионофор кальция, иономицин) с целью повышения уровня внутриклеточного кальция в яйцеклетке и запуска процессов оплодотворения.
Основные опасения, относительно применения АОА, связаны с неизвестным эффектом стабильно повышенного уровня кальция в крови по сравнению с колебательным уровнем, который наблюдается при естественном оплодотворении или после традиционного ИКСИ. Также есть существуют предположения о возможных негативных последствиях для детей, рождённых после ИКСИ-АОА.
Однако, преимплантационное развитие и анализ профилей транскрипции генов, не выявили достоверной разницы между эмбрионами после традиционного ИКСИ и ИКСИ-АОА. Также на данный момент не обнаружено различий в здоровье детей, рожденных в результате сравниваемых методов.
Исследовательский вопрос: Может ли искусственная активация яйцеклеток помочь пациенткам, столкнувшимся с необъяснимым снижением или тотальным отсутствием оплодотворения после ЭКО/ИКСИ
Сравниваемые показатели: процент оплодотворения, количество перенесенных и криоконсервированных эмбрионов, процент наступления биохимической, клинической беременностей, живорождения, а также прерывания беременности
Дизайн исследования. Были проанализированы 3095 циклов, проведенных в Ninewells Assisted Conception Unit с 1 января 2014 по 31 декабря 2021 года (1610 циклов ЭКО и 1485 циклов ИКСИ). За 8-летний период TFF наблюдалось в 63/1610 циклах ЭКО и 60/1485 циклах ИКСИ.
Критерии исключения:
⛔ ооцитарный фактор (получено менее 3-х ооцитов, аномальное оплодотворение)
⛔ значительное снижение показателей эякулята (неподвижные сперматозоиды, высокий процент аномальных сперматозоидов, сперматозоиды, полученные хирургическим путем, криоконсервированные сперматозоиды).
В данном исследовании представлены результаты для 39 пар, у которых традиционное ЭКО/ИКСИ осложнилось ULF и/или TFF (n = 43 циклов), которые впоследствии подверглись ИКСИ-AOA (n = 50 циклов).
Демографические показатели в группах, получавших традиционное ЭКО/ИКСИ и ИКСИ-АОА, были одинаковыми из-за дизайна исследования и того, что каждая пациентка выступала в качестве самостоятельной контрольной группы.
Учитывая, что несколько пациенток прошли более одного цикла ЭКО/ИКСИ до проведения ИКСИ-АОА, традиционный цикл лечения ВРТ, предшествующий ИКСИ-АОА и первая последующая ИКСИ-АОА, были использованы для сравнения результатов лечения.
Результаты
✅ Не выявлено существенных различий в количестве яйцеклеток, полученных и оплодотворенных у одной пациентки между традиционными циклами ЭКО/ ИКСИ и последующими циклами ИКСИ-АОА. Однако количество нормально оплодотворенных яйцеклеток было значительно выше в циклах ИКСИ-АОА.
✅ Количество переносов свежих эмбрионов было значительно больше в циклах ИКСИ-АОА.
✅ Процент наступления биохимической, клинической беременностей, живорождения был достоверно выше в группе ИКСИ-АОА.
✅ Количество криоконсервированных эмбрионов было значительно выше в циклах ИКСИ-АОА.
✅ Процент прерывания беременности в циклах ИКСИ-АОА составил 30,4%. В циклах с традиционными ЭКО/ ИКСИ не было не было прерываний беременностей, однако в этой группе была только одна беременность.
Выводы
✔ ИКСИ-АОА позволяет преодолеть недостаточную активацию ооцитов, повышая тем самым частоту оплодотворения, что приводит к увеличению числа эмбрионов, доступных для переноса , а также более высокой частоте наступления беременности и живорождения.
✔ Установлено, что после проведения ИКСИ-АОА ошибки сегрегации хромосом во втором делении мейоза не увеличиваются (Capalbo et al., 2016). Также не возрастают и риски возникновения врожденных дефектов и нарушений развития нервной системы (Vanden Meerschaut et al., 2014a).
✔ Авторы говорят о необходимости разработки и внедрения в клиническую практику диагностического теста на экспрессию PLCz в сперматозоидах в рамках оценки мужской фертильности.