В московском Научно-исследовательском институте биомедицинской химии имени В. Н. Ореховича (ИБМХ) разработали новый метод, позволяющий более эффективно оценивать надежность доставки генов в живые клетки, в том числе с целью лечения болезней, рассказали РИА Новости в Министерстве науки и высшего образования.
Создателям генно-терапевтических средств нужно знать, насколько успешно лечебный материал доставлен в клетки в ходе трансфекции. Эта процедура — мощный инструмент, помогающий не только изучать клеточные процессы и молекулярные механизмы заболеваний, но и проводить коррекцию генетических нарушений.
Сейчас для изучения эффективности этого процесса используются так называемые репортерные гены — по их активности удается судить, попал ли терапевтический ген в клетки.
Ученые ИБМХ разработали метод электрохимической регистрации процесса ДНК-трансфекции. Он позволяет оценивать эффективность включения терапевтически значимого гена, причем применять дополнительный репортерный ген не требуется.
"Разработанный подход для оценки трансфекции ДНК основан на высокочувствительном сравнительном анализе электрохимических профилей контрольных и трансфицированных клеток. В ходе проведенных исследований мы зарегистрировали принципиальные различия в электрохимическом поведении белков клеточных мембран различных типов клеток. На основе полученных параметров смогли дифференцировать клетки на разных стадиях процесса трансфекции", — рассказала научный сотрудник лаборатории биоэлектрохимии ИБМХ Любовь Агафонова.
Новый подход позволяет в восемь раз эффективнее оценивать результаты трансфекции, чем применявшийся до сих пор метод проточной цитометрии. Кроме того, разработанный в ИБМХ способ не требует дополнительных реагентов. Его успешно опробовали на раковых клетках молочной железы, клетках фибробластов и нормальных лимфоцитах человека. В дальнейшем ученые планируют применить электрохимический подход к анализу других типов клеток.
Результаты работы опубликованы в международном научном журнале The Journal of Electroanalytical Chemistry. Исследование выполнялось при поддержке Минобрнауки в рамках программы научного центра мирового уровня "Цифровой дизайн и персонализированное здравоохранение".