Или зачем патологу парафин?
Что присходит после вырезки материала? Как кусочки с вырезки превращаюся в препараты? Рассказываю. Первый этап превращения - гистологическая проводка.
Проводка - это процесс постепенного пропитывания тканей парафином, основанный на принципе взаимной растворимости воды, этилового спирта, ксилола и парафина.
Эмпирически установлено, что наиболее тонкие и ровные срезы получаются с объектов, по консистенции близких к парафину. А чем тоньше срезы, тем лучше патологу видно ткани в микроскоп 🤷♀️.
В ходе проводки образцы ткани еще немного фиксируют формалином, затем отмывают водой, потом помещают в спирты возрастающей концентрации. Таким образом, вода в ткани замещается на спирт, потому что спирт растворим в воде. Далее следует ксилол (органический растворитель, растворимый в спирте и одновременно парафине), а потом расплавленный парафин, который вытесняет ксилол. В итоге мы получаем кусочек, пропитанный парафином.
Вся проводка происходит в автоматизированном режиме в аппарате (гистопроцессоре) и длится от 15 до 18 часов (запуск сразу после окончания вырезки и до следующего утра). Ускорить этот процесс нельзя, иначе ткань не пропитается парафином и образец будет испорчен.
Корзину с кассетами (на фото), внутри которых образцы ткани с вырезки, помещают в реторту аппарата, в которую по очереди поступают разные растворы.
Есть и другие варианты проводки. У нас в отделении вместо этилового спирта и ксилола используется изопропиловый спирт. Он растворим в воде и парафине. Переход на изопропиловый спирт связан во-первых с токсичностью ксилола, а во-вторых со сложностями обращения этилового спирта (отчетность за каждый израсходованный миллилитр).
Ведь растворы в гистопроцессоре необходимо постоянно менять, а в год мы расходуем порядка тонны спирта и парафина.
В следующем посте расскажу как появляются парафиновые блоки😉