Кристаллизация белков — это процесс перехода белков из жидкостного состояния в твердое кристаллическое, он является завершающей стадией очистки белка и служит доказательством его гомогенности. Кристаллизация может быть использована для определения трехмерной структуры белков методом рентгеноструктурного анализа, а также для стабилизации белка при хранении.
Белки могут кристаллизоваться при строго определенных условиях:
- определенной кислотности раствора;
- определенной температуре;
- в присутствии вещества-осадителя определенной концентрации.
Диффузия паров летучих веществ — наиболее часто используемый способ кристаллизации белков, который предполагает наличие капли, содержащей очищенный белок, буфер и осаждающее вещество, а также резервуар с аналогичным осадителем в более высокой концентрации. За счет диффузии паров происходит медленное возрастание концентрации осаждающего вещества в капле белка и его кристаллизация.
Различают 2 метода кристаллизации при диффузии паров летучих веществ:
- с «висячей» каплей белка, когда капля находится непосредственно над осадителем с внутренней стороны крышки резервуара с белком;
- с «сидячей» каплей белка — этот метод требует наличия специального планшета, белок также находится над осадителем, но располагается в лунке на возвышении.
Планшеты для кристаллизации белков более удобны в эксплуатации, рост белковых кристаллов происходит в строго заданных рамках. Планшеты обеспечивают высокую пропускную способность образования белковых кристаллов и их скрининг. А за счет стандартного расположение белковых лунок обеспечивается совместимость с дозирующим оборудованием и системами визуализации.
Планшеты для кристаллизации белков изготовлены из полимеров, устойчивых к агрессивному воздействию осадителей, с низким водопоглощением для минимизации потери белка; имеют низкую или нулевую поляризацию, что обеспечивает оптическую прозрачность и позволяет провести микроскопию в поляризованном свете.
Более подробную информацию вы можете прочитать здесь.