После монголо-татарского нашествия 1241-1242 годов Поднепровье вновь стало заселяться славянами только в XIV-XV веках, но эти люди имели уже мало общего с прежними обитателями этих мест. Сильные, решительные, превосходно владеющие оружием, они шли в днепровские земли за свободой и землёй, за которые им пришлось сражаться с татарскими ордами. Жизнь в постоянной опасности выковала новую славянскую народность, представители которой сами себя называли казаками (тюркское "бездомный скиталец") и вскоре казаки заполонили собой всё Поднепровье, получив в 1625 году организационное оформление в виде Переяславского казачьего полка.
Вообще, казачьи воинские формирования на землях будущего Переяславского казачьего полка появились ещё в 1585 году и их формированию активно способствовал князь Василий-Константин Острогожский, а в 1625 году в связи с усилением процесса польской колонизации Украины прежде разрозненные казаки Поднепровья были объединены в один Переяславский полк из 10 сотен. Создавая столь мощное формирование реестровых казаков, поляки преследовали цели не только защиты Поднепровья от татарских набегов, но и удержания украинцев в повиновении, но со вторым дела пошли из рук вон плохо - Переяславский казачий полк стал надёжным прибежищем для всех недовольных польской оккупацией, а во время крестьянско-казачьих восстаний постоянно в полном составе переходил на сторону восставших (отдельные казаки полка всё же оставались верными полякам, если их объединяли харизматичные командиры типа Ильяша Караимовича, но это было скорее исключение, чем правило).
Поднявшего восстание против Речи Посполитой Зиновия Хмельницкого переяславские казаки поддержали сразу и безоговорочно, активно участвуя во всех его сражениях с поляками и поддерживая все его начинания (что тут говорить, если рада, на которой было принято решение о воссоединении Украины с Россией, состоялась 8 января 1654 года именно в полковом центре Переяславле). Сам же Переяславльский полк продолжал сражаться с поляками и крымскими татарами и дальше и во многом благодаря усилиям его казаков Поднепровье всё же осталось за Россией.
В XVII-XVIII веках Переяславский казачий полк был полностью верен России, активно участвуя во всех войнах, которые она вела, отличившись, в частности, при взятии Очакова в 1737 году и в битве под Кагулом 21 июля 1770 года. К 1723 году Переяславский полк был грозной силой, насчитывавшей 17 сотен, имевших в своём составе 2188 пехотинцев и 4152 кавалериста, но после окончания русско-турецкой войны 1768-1775 годов столь мощное воинское формирование сочли излишним, к тому же тут прибавился и страх после восстания Емельяна Пугачёва, поэтому в ходе административной реформы Екатерины II в 1782 году Переяславский казачий полк был упразднён, его земли были переданы Киевскому наместничеству, а его казаки были обращены в государственных крестьян.
