Методология в микробиологии

Апертура темнопольного конденсора должна быть на 0,2-0,4 единицы больше апертуры объектива. В противном случае часть боковых лучей попадет в объектив, что вызовет частичное освещение поля зрения и снижение контраста. Поэтому наблюдение в темном поле ведут обычно с иммергированным конденсором, имеющим апертуру около 1,2 и сухими системами с числовой апертурой 0,65-0,85. Когда используют объектив с большей апертурой, то для получения четкого изображения объектив обязательно диафрагмируют, т. е. снижают его апертуру...

Следует попытаться определить очертания клеток вагинального эпителия — имеют ли все клетки четкие границы. Если происходит нарушение равновесия в микроэкологии влагалища, и абсолютно доминирующие лактобациллы замещаются мелкой кокковой микрофлорой, клетки вагинального эпителия выглядят покрытыми большим количеством этой микрофлоры. Это покрытие скрывает очертания клетки, образуя, так называемые, «ключевые клетки». Следует подчеркнуть, что применение объектива ×10 не обеспечивает очень четкое изображение...

Этим методом выявляют гликогеноподобные вещества. 1. Мазок суспензии на предметном стекле фиксируют нагреванием. 2. На 5 минут на стекло наносят раствор перйодата [20 мл 4%-ной (вес/объем) йодной кислоты в воде, 10 мл 0,2М водного ацетата натрия и 70 мл 95%-ного этанола; защищать раствор от света!]. 3. Отмывают стекло 70%-ным (объем/объем) этанолом. 4. На 5 минут наносят на предметное стекло восстанавливающий раствор, содержащий 300 мл этанола, 5 мл 2Н соляной кислоты, 10 г йодистого калия, 5 г тиосульфата натрия (пятиводного), 200 мл дистиллированной воды...

Предметные и покровные стекла должны соответствовать по толщине, показателю преломления и дисперсии значениям, принятым при расчете объективов и конденсоров микроскопа. В противном случае они будут ухудшать качество изображения. Особенно важно соблюдать расчетные значения при ответственных экспериментах. При менее ответственных работах можно допустить некоторые отступления этих величин, Требования к предметным и покровным стеклам тем выше, чем больше численная апертура объективов. Кроме того, эти требования зависят от метода наблюдения...

Клетки микроорганизмов окрашивают главным образом анилиновыми красителями. Различают кислые и основные красители. К кислым красителям относятся те, у которых ион, придающий окраску (хромофор), - анион. У основных красителей хромофором является катион. Примером кислых красителей служит эозин, эритрозин, нигрозин, кислый фуксин; все эти красители интенсивно связываются с цитоплазматическими компонентами клетки...

Является простым методом окраски, поэтому имеет не высокую диагностическую ценность. Притом позволяет выявлять некоторые специфические микроорганизмы. Процедура окрашивания: 1. Препарат высушивают на воздухе. 2. Высушенный препарат опускают в стакан с 1% метиленовым синим по Леффлеру на 1–2 мин. 3. Промывают погружением в другой стакан с водопроводной водой...