Как я уже написала в прошлой статье про постановку ПЦР, температура отжига - это ключевой фактор для этого процесса. Если она подобрана неправильно, может ничего не получиться. Температура отжига (annealing temperature) - это температура, при которой праймеры садятся на ДНК. И после этого, на следующей стадии удлинения цепи (elongation) начинается наращивание цепи, начиная с места, где сели праймеры. Если праймеры не сядут на ДНК, то наращивать будет нечего. Температура отжига варьирует в больших пределах, от 40С до 70С. Крайние температуры используются редко, чаще всего подходящая температура отжига от 50С до 65С...