По сюжету нового мультика братья Марио (в оригинале озвучивает Крис Прэтт) и Луиджи (Чарли Дэй) узнают о новой таинственной угрозе вселенского масштаба. Она может возникнуть из-за опасного Боузера-младшего (Бенни Сэфди) – сына Боузера (Джек Блэк). Он попытается спасти отца, которого Марио и Луиджи держат в плену. Действия злодея наверняка будут иметь крупные последствия. Водопроводчики отправятся в большое путешествие, чтобы предотвратить возможную катастрофу. В трейлере подтвердили, что новым союзником Марио и Луиджи станет очаровательный динозаврик Йоши...