Праймеры и температура отжига
Как я уже написала в прошлой статье про постановку ПЦР, температура отжига - это ключевой фактор для этого процесса. Если она подобрана неправильно, может ничего не получиться. Температура отжига (annealing temperature) - это температура, при которой праймеры садятся на ДНК. И после этого, на следующей стадии удлинения цепи (elongation) начинается наращивание цепи, начиная с места, где сели праймеры. Если праймеры не сядут на ДНК, то наращивать будет нечего. Температура отжига варьирует в больших пределах, от 40С до 70С. Крайние температуры используются редко, чаще всего подходящая температура отжига от 50С до 65С...
ПЦР Часть 1. Практические рекомендации по подготовке проб
Я уже написала ранее, как лучше и быстрее выделять ДНК. Эта моя статья касается полимеразной цепной реакции. Я не буду подробно останавливаться на том, что это такое. Конечно, если вы хотите применять эти методы в лаборатории, то вам надо знать строение ДНК и как происходит ПЦР, и для этого я вас отправляю к отличной длинной статье на Биомолекуле. И в интернете очень много видео на эту тему. А лучше всего прочитать соответствующие главы в любом учебнике по молекулярной биологии. Что касается практики,...