405 подписчиков
Использование флуоресцентного красителя BioTracker Blue увеличивает эффективность лазерного поглощения, но не способствует повышению вероятности слияния клеток.
📖 К такому выводу пришли ученые из ФИЦ ХФ РАН, результаты работы которых были опубликованы в свежем выпуске журнала JETP letters.
🔬 Известно, что применение специфических флуоресцентных красителей способно снизить порог ионизации меченых клеточных структур при фемтосекундном лазерном воздействии. Эта особенность может применяться в рамках лазерной нанохирургии клетки. В данной работе использовали витальный краситель BioTracker Blue (Sigma Aldrich) в качестве фотосенсибилизатора. Липофильный краситель связывался с липидами, окрашивая, в том числе, и цитоплазматическую мембрану, и применялся для более прецизионного контроля абляции цитоплазматической мембраны фемтосекундным лазером. Лазерное излучения на длинах волн 730-790 нм направляли на область контакта клеток с целью инициировать их слияние. Ожидалось, что краситель с пиком поглощения 366 нм повысит эффективность поглощения лазерного излучения на длинах волн 730 – 790 нм за счёт двухфотонного процесса и тем самым повысит вероятность слияния клеток.
✔️ В работе установлено, что BioTracker Blue (366/441) действительно увеличивает эффективность поглощения лазера с длиной волны 760 и 730 нм. Однако повышение эффективности поглощения, обусловленное окрашиванием BioTracker Blue, не повышало вероятность слияния клеток в модельных системах: парах суспендированных клеток А549, ооцитов и их полярных телец, двухклеточных эмбрионов, а в некоторых случаях лишь повышало вероятность разрушения образцов.
☝️ Известно, что в результате многофотонной ионизации образуется плазма низкой плотности, и она состоит из радикалов и свободных электронов. Краситель, связанный с цитоплазматической мембраной, может продуцировать дополнительные свободные радикалы за счет двухфотонного поглощения. Возможно, что окисление и/или распад липидов в результате фотолиза в области лазерной обработки также может нарушать образование пор и слияние клеток.
1 минута
20 июня 2023