Пыльца
Как проверить жизнеспособность (фертильность) пыльцы под микроскопом после сбора, пересылки или хранения??
Проверка жизнеспособности (тест на фертильность) необходима, чтобы не тратить время на опыление «пустышкой». Для пионов используют два основных метода: окрашивание (быстрый) и проращивание (точный).
1. Метод окрашивания (Ацетокармин или йод)
Этот метод показывает, содержит ли пыльцевое зерно цитоплазму и крахмал. Он не гарантирует 100% прорастания, но позволяет сразу отсеять мертвый материал.
Что понадобится: Микроскоп (увеличение 100x–400x), предметное стекло, 1% раствор ацетокармина (профессионально) или обычный раствор Люголя (йод).
Процесс: Нанесите каплю раствора на стекло, стряхните туда немного пыльцы и накройте покровным стеклом. Подождите 5–10 минут.
Результат:
Фертильные зерна: Окрашиваются в интенсивный красный (ацетокармин) или темно-коричневый/черный (йод) цвет. Они выглядят полными и округлыми.
Стерильные зерна:
Остаются бесцветными, сморщенными или прозрачными.
Оценка: Подсчитайте 100 зерен в поле зрения. Если окрашено более 70–80%, пыльца отличная.
2. Метод проращивания на искусственной среде (In Vitro)
Это самый достоверный способ, так как он имитирует реальный процесс на рыльце пестика.
Приготовление среды: Сделайте раствор: 10–15% сахарозы (обычный сахар) и 0,01% борной кислоты в дистиллированной воде. Можно добавить 1% агар-агара для получения геля.
Процесс:
Нанесите каплю раствора на предметное стекло (метод «висячей капли»).
Аккуратно нанесите пыльцу на поверхность капли.
Поместите стекло в самодельную «камеру влажности» (контейнер с мокрой салфеткой на дне) на 2–4 часа при температуре +22…+25°C.
Результат под микроскопом:
Вы увидите «хвосты» — пыльцевые трубки, которые начали расти из зерен.
Пыльца считается качественной, если длина трубки в 2–5 раз превышает диаметр самого зерна.
3. Экспресс-метод «на коленке»
Если микроскопа нет, профессионалы иногда используют «полевой» тест:
Нанесите пыльцу на рыльце свежего цветка любого простого пиона. Через 6–12 часов аккуратно срежьте рыльце и посмотрите через сильную лупу (от 20х). Жизнеспособная пыльца «прилипает» и начинает менять текстуру рыльца, оно становится визуально менее блестящим из-за прорастания трубок.
Важные нюансы для пионов:
Тетраплоиды vs Диплоиды:
У межвидовых гибридов (тетраплоидов) пыльца часто крупнее и имеет более высокий процент деформаций даже при хорошей фертильности — это нормально.
Время «оживания»: После глубокой заморозки пыльце нужно время. Проводите тест только через 1–2 часа после полной разморозки ( если пыльца хранилась) в закрытой пробирке.
