Более 15 процентов супружеских пар сталкиваются с проблемой бесплодия, при этом вклад мужского фактора, по данным различных исследований, составляет от 30 до 50 процентов. Одной из ключевых причин снижения мужской фертильности является астенозооспермия - состояние, при котором отмечается снижение подвижности или полное отсутствие подвижных сперматозоидов в эякуляте.
Подвижность сперматозоидов имеет критическое значение для оплодотворения, так как обеспечивает их миграцию по женскому репродуктивному тракту и последующую пенетрацию в ооцит. Нарушение этого показателя напрямую ухудшает фертильный прогноз.
Инфекции урогенитального тракта и мужское бесплодие
Одной из значимых причин астенозооспермии являются инфекции урогенитального тракта, которые во многих случаях протекают бессимптомно и остаются недиагностированными.
К классическим облигатным патогенам относятся:
- Chlamydia trachomatis
- Neisseria gonorrhoeae
Однако в последние годы всё большее внимание уделяется условно патогенной микробиоте, которая также способна инициировать инфекционно-воспалительные процессы и оказывать негативное влияние на сперматогенез.
При культуральном исследовании эякулята у мужчин с клиническими проявлениями инфекций УГТ чаще всего выявляются:
- Enterobacteriaceae, преимущественно Escherichia coli
- Staphylococcus spp., включая Staphylococcus aureus
- Enterococcus spp., в том числе Enterococcus faecalis
Влияние бактерий на подвижность сперматозоидов
Ряд экспериментальных исследований in vitro показал, что бактерии и их метаболиты могут оказывать прямое повреждающее действие на сперматозоиды.
Установлено, что инкубация сперматозоидов с культурами Serratia marcescens и Klebsiella pneumoniae приводит к агглютинации сперматозоидов и выраженному снижению их подвижности. Аналогичные эффекты наблюдались при взаимодействии со Staphylococcus aureus и Staphylococcus saprophyticus.
Предполагается, что гемолизины и другие бактериальные факторы вирулентности оказывают токсическое воздействие на мембраны сперматозоидов, нарушая их морфологию и функциональную активность.
Ограничения культуральных методов
Несмотря на широкое применение, культуральные методы исследования эякулята имеют существенные ограничения. Значительная часть микроорганизмов относится к трудно культивируемым или некультивируемым видам, что приводит к заниженной оценке микробного разнообразия.
Кроме того, результаты посева зависят от условий транспортировки, жизнеспособности бактерий и выбора питательных сред, что снижает воспроизводимость метода.
ПЦР в реальном времени как оптимальный метод исследования
Наиболее перспективным подходом к анализу микробиоты эякулята является применение полимеразной цепной реакции в реальном времени.
ПЦР-РВ позволяет:
- выявлять ДНК микроорганизмов независимо от их культивируемости
- количественно оценивать бактериальную нагрузку
- определять состав бактериальных ассоциаций
В ранее проведённых исследованиях показано, что при использовании ПЦР-РВ бактерии выявлялись у 64,3 процента мужчин с нормальными показателями спермограммы в концентрации от 10³ геном-эквивалентов на миллилитр. В одном образце одновременно обнаруживалось до 15 различных групп микроорганизмов, чаще всего облигатных анаэробов.
Эти данные указывают на то, что микробиота эякулята представляет собой сложную экосистему, а не результат действия одного патогена, и подчёркивают необходимость изучения бактериальных сообществ при астенозооспермии.
Клиническое значение исследования микробиоты эякулята
Комплексный анализ микробиоты эякулята позволяет:
- выявить скрытые инфекционно-воспалительные процессы
- оценить влияние бактериальных ассоциаций на подвижность сперматозоидов
- повысить точность диагностики причин мужского бесплодия
- оптимизировать тактику лечения и восстановление фертильности
Для исследования микробиоты эякулята применяются ПЦР-анализаторы в реальном времени, автоматизированные системы выделения нуклеиновых кислот и молекулярно-биологические платформы для мультиплексного анализа.