Пневмококк. Тест лизиса в присутствии солей желчных кислот.
Принцип.
Соли желчи (в особенности дезоксихолат натрия и таурохолат натрия) обладают способностью избирательно лизировать колонии S. pneumoniae на агаре или в бульоне. Метод основан на активации пневмококковых аутолизинов ферментов, участвующих в синтезе клеточной стенки. Соли желчных кислот активируют аутолизины большинства штаммов, что приводит к визуальному лизису Streptococcus pneumoniae в течение 0,5–2ч.
Наиболее стандартизованным является пробирочный метод, однако идентификацию можно проводить и диско-диффузионным методом на агаре.
Для проведения теста на агаре нам потребуется:
1. Чистая 16-18ч культура S.pneumoniae на 5% кровяном агаре.
2. Диск дезоксихолата натрия.
3. Стерильная дистиллированная вода, которая наносится на диск для вымывания желчи (тест представленный на фотографиях делался без воды).
Интерпретация:
Через 2-18 часов инкубации производят учет результата теста. При положительном результате вокруг диска образуется зона полного или частичного лизиса колоний. При наличии частичного лизиса колонии становятся плоскими, тусклыми, меньшей высоты, чем соседние, вне зоны действия желчных кислот. В этом случае целесообразно использовать увеличительное стекло.
📷На фото: 1. Чистая культура S.pneumoniae с диском дезоксихолата натрия; 2. Лизис через 0,5ч; 3. Лизис через 2ч;
