Электронная микроскопия десятилетиями опиралась на токсичные реагенты, но исследование австрийских ученых показало, что обычный эспрессо может заменить их при подготовке биологических образцов. Исследователи установили, что кофе дает контраст при просвечивающей электронной микроскопии на уровне «золотого стандарта» — уранилацетата, оставаясь при этом нетоксичным вариантом, а результаты работы описаны в журнале Methods.
Просвечивающая электронная микроскопия позволяет изучать внутриклеточные структуры с нанометровым разрешением, однако ткани, состоящие в основном из легких элементов, почти не взаимодействуют с электронным пучком и без специальной обработки выглядят бесконтрастными. Для решения этой задачи образцы традиционно пропитывают солями тяжелых металлов, и наиболее распространенным реагентом остается уранилацетат — соединение на основе урана, хорошо связывающееся с мембранами и белками, но токсичное и радиоактивное, из‑за чего требует строгих мер безопасности и сложной утилизации.
Авторы обратили внимание на то, как кофейная гуща оседает на стенках чашек, и предложили использовать кофе как безопасную альтернативу таким реагентам. Для экспериментов был приготовлен крепкий эспрессо из зерен робусты, который применили для окрашивания ультратонких срезов тканей данио‑рерио, а в качестве тестового объекта выбрали митохондрии с двойной мембраной, удобные для оценки качества контраста. Параллельно те же образцы обрабатывали уранилацетатом и чистой хлорогеновой кислотой, одним из ключевых компонентов кофе.
Качество изображений оценивали не только визуально, но и с помощью количественного анализа контраста. Выяснилось, что эспрессо обеспечивает высокий уровень контрастности и в отдельных случаях даже превосходит уранилацетат, а хлорогеновая кислота продемонстрировала схожий эффект, что подтвердило ее важную роль в процессе окрашивания. Авторы подчеркивают практичность подхода: кофе доступен, не требует лицензий, специальной вентиляции и радиационной защиты, поэтому может заметно упростить работу лабораторий и снизить риски для персонала.
Читайте также: