Антимюллеров гормон (АМГ) относится к суперсемейству трансформирующих факторов роста бета (TGF β). Он действует через свой «рецептор II типа на мембране» (AMHR20), запуская фосфорилирование белков SMAD 1, 5 или 8 (small mothers against decapentaplegic). Эти молекулы активируют SMAD 4, который перемещается в ядро и запускает транскрипцию целевых генов.
Гены, зависимые от SMAD, — это:
• остеорикс (OSX);
• матриксная металлопептидаза 2 (MMP2);
• ингибирующий фактор WNT (WIF1).
У женщин АМГ может вырабатываться гранулезными клетками яичников. Секреция АМГ достигает максимальных уровней на преантральной и ранней антральной стадиях, а затем снижается на антральной стадии — в период гонадотропин - зависимого роста фолликулов.
Ряд исследований показал, что АМГ опосредует аутокринные и паракринные эффекты на ранних стадиях фолликулогенеза. В этот период гормон вырабатывается растущими фолликулами и отрицательно регулирует начальный рекрутинг фолликулов.
Кроме того, АМГ действует на гранулезные клетки развивающихся фолликулов аутокринным образом:
• снижает чувствительность к гонадотропинам;
• подавляет синтез ароматазы.
Клинические данные указывают на связь между:
• АМГ;
• уровнями гонадотропинов;
• физиологией яичников на антральной стадии.
АМГ предложен в качестве надёжного диагностического показателя резерва фолликулов яичников — альтернативы подсчёту антральных фолликулов.
Действительно, уровни АМГ в сыворотке относительно низки у пациенток с преждевременной недостаточностью яичников, для которой характерны низкие уровни гонадотропинов.
Напротив, уровни АМГ и лютеинизирующего гормона (ЛГ) высоки у пациенток с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ). Эти исследования показывают, что ЛГ может играть значительную роль в стимулировании раннего рекрутинга, роста и созревания фолликулов яичников, влияя на физиологию АМГ.
Гипотеза клинически подтверждается эффективностью лечения ЛГ у женщин с гипоталамической аменореей: у них улучшался подсчёт антральных фолликулов, повышались уровни АМГ и увеличивалось число зрелых ооцитов.
В совокупности эти исследования обосновывают необходимость изучения взаимосвязи между ЛГ и АМГ в клетках яичников — вопроса, который пока изучен недостаточно.
Цель данного исследования in vitro — выяснить, модулирует ли ЛГ действие АМГ в гранулезных клетках яичников.
Методы: Первичные клетки гранулезно-лютеиновой оболочки человека, выделенные у пациенток с экстракорпоральным оплодотворением (ЭКО), предварительно обрабатывали рекомбинантным ЛГ с последующей стимуляцией рекомбинантным АМГ. Экспрессию рецептора АМГ II типа (AMHR2), активацию передачи сигналов АМГ и экспрессию генов, чувствительных к АМГ, оценивали с помощью ОТ-ПЦР, ELISA и вестерн-блоттинга. Вовлечение рецептора ЛГ было подтверждено с помощью нокдауна, опосредованного siRNA.
Результаты: было показано, что лечение ЛГ снижает регуляцию транскриптов и белка AMHR2, нарушая индуцированное AMГ фосфорилирование SMAD 1, 5 и предотвращая экспрессию генов osterix (OSX) и матриксной металлопротеазы 2 (MMP2).
Выводы: Эти данные согласуются с гипотезой о возможном взаимодействии гонадотропинов и АМГ в клетках антральной/лютеиновой стадии и служат молекулярной основой для дальнейших исследований, направленных на изучение влияния ЛГ на передачу сигналов АМГ и реакцию фолликулов во время антральной стадии.