Анеуплоидия и "плохие" репродуктивные исходы тесно связаны. Анеуплоидные эмбрионы - основная причина невынашивания беременности и врожденных генетических аномалий при рождении живых детей.
Генетическое тестирование в программах ЭКО проводится с целью снижения риска потери беременности и уменьшения времени до рождения здорового ребенка в определенных группах пациентов.
Анеуплоидия в эмбрионе возникает из-за ошибок при расхождении сестринских хроматид или парных гомологичных хромосом в процессе мейоза или митоза.
Различия между мейотической и митотической анеуплоидиями имеют решающее значение!!!
Мейотические ошибки возникают во время образования гамет (половых клеток) и будут присутствовать во всех клетках образованного эмбриона. Следовательно, эмбрионы с мейотической анеуплоидией имеют крайне низкий репродуктивный потенциал.
Напротив, митотические ошибки возникают после оплодотворения и приводят к возникновению мозаичных эмбрионов.
Единое мнение относительно мозаичности отсутствует. Авторы данной статьи отмечают, что согласно опубликованным данным, перенос мозаичных эмбрионов может привести к рождению здоровых детей.
Данная статья, опубликованная в журнале Fertility and Sterility, посвящена проблеме "неточной" классификации хромосомных аномалий в эмбрионах при проведении преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидии (PGT-A) с использованием методов секвенирования нового поколения (NGS). Авторы исследовали, насколько часто современные методы NGS ошибочно определяют мейотические анеуплоидии как мозаицизм.
Цель исследования:
Основной целью исследования было изучение биологического происхождения хромосомных аномалий в эмбрионах, которые после проведения PGT-A методом NGS классифицировались как мозаичные. Кроме того, авторы стремились оценить точность современных методов NGS в распознавании мейотических и митотических ошибок.
Авторы провели ретроспективное когортное исследование. Средний возраст пациенток - 38,9 лет. Всего было пробиопсировано 1318 эмбрионов:
- 471 - эуплоидные
- 653 - анеуплоидные
- 177 - мозаики
- 17 - нет результата
Свое разрешение на исследование дали 87 пациентов (146 мозаичных эмбрионов). Для определения происхождения хромосомных ошибок было выполнено SNP-генотипирование (на том же самом амплифицированном материале, который использовался для PGT-A методом NGS).
Что сравнивали: доля эмбрионов, заявленных как мозаичные после NGS, которые содержали мейотические ошибки и распределение ошибок мейотического и митотического происхождения.
Результаты. Из 146 мозаичных эмбрионов
- 5 - триплоиды (исключены из дальнейшего исследования)
- 78 эмбрионов - высокий уровень мозаицизма
- 63 эмбриона - низкий уровень мозаицизма
В целом SNP выявило мейотическое происхождение анеуплоидии у 32,6% всех эмбрионов (46 из 146).
В группе эмбрионов с высоким уровнем мозаицизма (более 50%) - это 43 из 78 эмбрионов (55%).
В группе эмбрионов с низким уровнем мозаицизма (до 50%) - это 3 из 63 эмбрионов (4,7%).
У 141 проанализированного эмбриона была выявлена 191 индивидуальная мозаичная хромосомная ошибка (предположительно, 135 - митотического, 56 - мейотического происхождения).
- 118 ошибок затрагивали целые хромосомы (из них 50 (42,3%) имели мейотическое происхождение)
- 73 - сегменты хромосом (из них 6 (8,2%) имели мейотическое происхождение)
В целом 94,6% мейотических ошибок имели материнское происхождение.
Выводы. Несмотря на то, что PGT-A на основе NGS надежно выявляет однородные анеуплоидии (хромосомные аномалии, при которых число хромосом в клетках не кратно гаплоидному набору), данное исследование показывает, что более трети эмбрионов, классифицируемых как мозаики, содержат ошибки мейотического происхождения. Таким образом, мозаицизм остается клинической дилеммой без надежного диагностического подхода.
Основным источником различий в клинических результатах авторы считают критерии, используемые для выявления мозаичного статуса эмбриона:
- доля анеуплоидных клеток (т.е. уровень мозаичности)
- природа анеуплоидии, участвующей в мозаичности (например, сегментарная
или цельная хромосома) - количество вовлеченных хромосом
Данное исследование показывает, что вышеперечисленные критерии мозаичности могут привести к переносу мейотически анеуплоидных эмбрионов и к исключению потенциально здоровых эмбрионов без признаков мейотической анеуплоидии. Отсутствие надежной диагностики мозаицизма при ПГТ-А, вероятно, является причиной значительно более низких показателей имплантации предполагаемых мозаиков по сравнению с эуплоидными эмбрионами и их более высокой вероятностью самопроизвольного прерывания беременности на ранних сроках. Авторы подчеркивают важность SNP-анализа для более точного определения происхождения анеуплоидии, так как при таком подходе можно получить более достоверное представление о репродуктивном потенциале предполагаемых мозаичных эмбрионов.