Всем доброго утра, дня или вечера! Мы продолжаем разбирать иммунобиологические препараты. Сегодня подробно рассмотрим 2 группу ИБП: иммуноглобулины и иммунные сыворотки. Не стоит забывать, что кроме лечебно-профилактических сывороток, существуют еще и диагностические сыворотки. Но о них мы поговорим отдельно когда - нибудь.
Эта тема вызывает у меня грусть и чувство вины. Хотя с моей профдеформацией и отсутствием сострадания к человечеству, звучит довольно абсурдно.
Опять вспомним общую терминологию и классификацию.
Медицинские иммунобиологические препараты (ИБП)- биологически вещества, основу механизма действия которых составляют иммунные реакции, оказывающие на иммунную систему специфическое действие и воздействующие на патологический процесс через иммунную систему. Выделяют пять основных групп ИБП.
1 ГРУППА- ИБП, получаемые из живых или убитых микроорганизмов (бактерий,вирусов, грибов) или бактериальных продуктов и используемые для специфической профилактики и лечения. К этой группе относятся вакцины (в том числе анатоксины), бактериофаги, пробиотики;
2 ГРУППА - ИБП на основе АТ: препараты Ig и иммунные сыворотки-антитела;
3 ГРУППА - иммуномодуляторы;
4 ГРУППА - адаптогены - вещества растительного происхождения, действующие опосредованно на иммунную систему;
5 ГРУППА - иммунодиагностические препараты.
ИММУНОГЛОБУЛИНЫ И ИММУННЫЕ СЫВОРОТКИ
Иммуноглобулины и иммунные сыворотки - ИБП, содержащие используемые для лечения и экстренной профилактики патологических состояний путем создания искусственного пассивного иммунитета.
Очищенные и концентрированные иммунные сыворотки называют иммуноглобулинами.
- Виды иммунных сывороток по способу получения: полученные от животных (гетерологичные сыворотки) и людей (гомологичные сыворотки).
2. Иммунные сыворотки в зависимости от природы антител.
-Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.
-Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.
-Противовирусные сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.
ПРОИЗВОДСТВО
Иммунные сыворотки получают из крови гипериммунизированных (интенсивно иммунизированных) животных (лошади, ослы, кролики) соответствующей вакциной или крови иммунизированных людей (используется донорская, плацентарная, абортная кровь),но в основном используют лошадей.
СЫРЬЕ
Лошадей берут после тщательного их клинического осмотра и проведения необходимых аллергических, серологических и бактериологических исследований. Пригодными для сывороточного производства считаются лошади в возрасте от 5 до 10 лет «сухой конституции», хорошей упитанности, весом не ниже 350 кг.
Перед отправкой им вводят 5-10 мл столбнячного анатоксина для создания грунд-иммунитета (базовый иммунитет). В производственных институтах вновь прибывших лошадей помещают в карантин на три месяца. В это время проводится тщательное клиническое наблюдение за состоянием их здоровья, и осуществляются лабораторно-клинические исследования, имеющие целью исключить сап, бруцеллез, туберкулез, инфекционный аборт, болезни крови, глистные инвазии и кожные заболевания.
В первые три недели никаких антигенов им не вводят, кроме столбнячного анатоксина (вторая инъекция - 10-20 мл для создания грунд-иммунитета). Спустя 90 дней с момента прибытия карантин снимается, и здоровые лошади переводятся в иммунизационный отдел, где осуществляется их дальнейшая эксплуатация.
Поступающие в иммунотделы институтов лошади, как правило, находятся там до конца своей жизни. Обычный конец лошадей продуцентов иммунных сывороток - гибель от разрыва печени вследствие ее перерождения в процессе иммунизации или от искусственно-произведенного тотального кровопускания в тех случаях, когда дальнейшая эксплуатация лошади становится нерентабельной.
Лошади - продуценты сывороток - имеют специальный пищевой рацион, обеспечивающий их потребности в белках, углеводах, минеральных веществах и витаминах.
Подготовка лошади производится во время так называемого первого цикла иммунизации. В это время лошади вводят антиген, начиная с минимальных доз (5-10 мл) и постепенно доводят количество его до 200-300 мл. Время от времени проверяют содержание антител, появляющихся в сыворотке животного в результате иммунизации. Когда титр антител достигает нужного уровня, у лошади берут большое количество крови для приготовления сыворотки.
ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС
Полученная от лошадей кровь передается из иммунотдела в лабораторию технической обработки сыворотки. Здесь жидкая часть крови отделяется на сепараторах от форменных элементов и собирается в стерильные бутыли, после чего производится дефибринирование плазмы. Сыворотку отделяют от сгустков, разливают в бутыли, консервируют хлороформом (0,5 %), фенолом (0,5 %) или хинозолом (0,025-0,05 %).
Принцип очистки и концентрации сывороток сводится к следующему:
- Извлечение общих глобулинов. Сыворотка разводится в три раза дистиллированной водой и на каждый литр полученной жидкости добавляется 450 г сухого химически чистого сернокислого аммония. Выпавшие в осадок глобулины отфильтровываются через специальную фильтроткань, отжимаются на прессах для освобождения от содержащегося в них раствора соли и подвергаются диализу через полупроницаемую мембрану (целлофановые или вискозные мешки) против проточной воды. Отфильтрованный альбумин выбрасывается, а глобулины подвергаются дальнейшей обработке.
- Ферментация глобулинов. В полученном после диализа растворе глобулинов определяется количество белка, и затем он разводится водой так, чтобы довести содержание белка до трех процентов. После этого к раствору глобулинов добавляется определенное количество пепсина и ферментирование производится в течение 2 часов сначала при рН 3,2 (1 час), затем при рН 4,2 (также один час).
- Разделение глобулинов. По окончании ферментации к раствору глобулинов добавляется сернокислый аммоний из расчета 140 г на 1 литр. Смесь прогревается при 58 °С в течение 45 минут. Осажденный эвглобулин отфильтровывается и выбрасывается. К фильтрату, содержащему сильно разбавленный псевдоглобулин, после подщелачивания до рН 7,0-7,1 добавляется сернокислый аммоний из расчета 200 г на 1 литр. Образовавшийся осадок псевдоглобулина отфильтровывается, прессуется в подвергается диализу,
Полученная после диализа жидкость представляет собой концентрированный раствор псевдоглобулина. Для более полной очистки он дополнительно обрабатывается хлороформом и соляной кислотой. Хлороформ добавляется в количестве 30 % к объему раствора после установления в нем рН 6,5-5,7, соляная кислота - в количестве, установленном специальной предварительной пробой. Выпавшие балластные белки удаляются центрифугированием в специальных центрифугах или с помощью сепараторов.
СТАНДАРТИЗАЦИЯ
Этот процесс имеет целью придать полученному очищенному псевдоглобулину стандартные показатели, касающиеся содержания белка, значения рН и изотоничности раствора.
СУШКА
Готовая сыворотка представляет собой прозрачную жидкость, иногда полностью бесцветную, иногда окрашенную в желтоватый или зеленоватый цвет. Сыворотка сохраняется при температуре 4-10 °С, срок годности ее 2 года.
Сушка сывороток осуществляется в камерных, либо на коллекторных аппаратах. Сухая сыворотка из колб пересыпается в стерильные широкогорлые бутыли, в которых она и сохраняется под плотными резиновыми пробками.
Высушенные препараты хранятся в сухом, темном помещении при температуре, не превышающей 20 °С. Срок хранения сыворотки не ограничен.
ПРЕПАРАТЫ И ИММУНИЗАЦИЯ
Иммунные сыворотки и иммуноглобулины создают пассивный иммунитет практически сразу же после их введения. Он сохраняется при введении гомологичных сывороток до 4-5 нед, а при введении гетерологичных сывороток - до 2-3 нед. Перед инъекцией сывороточных препаратов обязательна постановка внутрикожной пробы на чувствительность (сенсибилизацию) к препарату. Для профилактики анафилактического шока его вводят дробно (по методу Безредки).
У меня в приемном отделении была только "Сыворотка против яда гадюки". На этом сывороточная помощь моей многопрофильной больницы заканчивается. Но это не вина моей организации, а просто большое количество проверок и огромные штрафы и так нищего бюджета, не вызывает большого энтузиазма в расширении ассортимента лечебно-профилактических сывороток.
Эта тема популярна на экзаменах, как дополнительный вопрос. Не знаю как в других вузах, а мы постоянно сдавали номенклатурный список препаратов. Преподаватель в моем ответе хотел слышать из чего состоит препарат, способ получения и с какой целью применяется.
Вот сейчас я сдала бы это на высший балл, а в универе мне с натяжкой ставили "удовлетворительно". Но осознание и понимание хоть чего-то приходит со временем. Поэтому не расстраивайся, все придет, но гораздо позже.
Всем хорошего дня или вечера! Удачных сдач и пересдач! Вот вам лошадку на удачу!
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ: Основы микробиологии и иммунологии Зверева В.В. и Бойченко М.Н.
Инфекционным болезням и эпидемиологии Покровского В.И. С.Г. Пак, Н.И. Брико, Б.К. Данилкина.
Перетрухина А. Т., Блинова Е. И., Бактерийные и вирусные препараты.
Учебники по Микробиологии Воробьева А.В., Быкова А.С.
МИКРОБИОЛОГИЯ Л. М. Закарян.