Апертура темнопольного конденсора должна быть на 0,2-0,4 единицы больше апертуры объектива. В противном случае часть боковых лучей попадет в объектив, что вызовет частичное освещение поля зрения и снижение контраста. Поэтому наблюдение в темном поле ведут обычно с иммергированным конденсором, имеющим апертуру около 1,2 и сухими системами с числовой апертурой 0,65-0,85. Когда используют объектив с большей апертурой, то для получения четкого изображения объектив обязательно диафрагмируют, т. е. снижают его апертуру. С этой целью в объектив, извлеченный из револьвера, вводят специальную вставную диафрагму, которая входит в комплект выпускаемых темнопольных конденсоров. Еще удобнее пользоваться объективами, снабженными ирисовой диафрагмой, расположенной между линзами. Вращением специального кольца, имеющегося на оправе, изменяют диаметр отверстия диафрагмы и тем самым снижают числовую апертуру объектива.
При микроскопии в темном поле накал лампы осветителя должен быть максимальным, так как темнопольный конденсор пропускает лишь незначительную часть поступающего светового потока. Поэтому особое значение приобретает правильная установка света, максимальное его использование и особенно тщательная центрировка.
При работе с темнопольным конденсором толщина предметных стекол не должна превышать 1,2 мм, так как все конденсоры темного поля имеют очень маленькое рабочее расстояние. В противном случае фокус конденсора окажется в толще предметного стекла, а не в плоскости препарата, и наблюдатель ничего не увидит.
При микроскопии в темном поле следует обращать внимание на толщину и чистоту препарата. Чем толще препарат и чем больше в нем посторонних частиц, преломляющих свет (пыль, пузырьки воздуха и т.д.), тем менее контрастным получается изображение, так как каждая частица, отражая лучи, освещает поле зрения. Поэтому для приготовления препарата используют тщательно очищенные предметные и покровные стекла.