Автор: IDEXX Laboratories Pty Ltd
ПЦР-тестирование сборного молока на вирус диареи крупного рогатого скота (BVD)
Контроль вируса диареи крупного рогатого скота (BVD) – это длительный процесс. Если лабораторный мониторинг не проводится на уровне стада, животные с персистентной инфекцией (ПИ) могут остаться невыявленными. Эти животные выделяют значительное количество вируса BVD на протяжении всей жизни и являются основным источником инфекции. Удаление ПИ-животных из стада – наиболее эффективный метод контроля и предотвращения распространения болезни.
Тестирование молока из общего танка является общепринятой практикой на протяжении многих лет¹. С появлением тестирования методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени для BVD затраты на отбор проб молока из танка стали значительно ниже. Теперь мы можем исследовать все стадо, объединяя индивидуальные пробы для скрининга.
Интерпретация результатов ПЦР-теста сборного молока на BVD
ПЦР-тест на BVD предназначен для обнаружения фрагментов вирусной РНК. Он не различает вирус, выделяемый коровами с персистентной (ПИ) и транзиторной инфекцией (ТИ) (транзиторные – временные носители, прим.переводчика). Коровы с персистентной инфекцией (ПИ) выделяют большое количество вируса. Коровы с транзиторной инфекцией обычно выделяют меньше вируса, но это зависит от стадии инфекции.
Ранее считалось, что вероятность обнаружения транзиторно-инфицированного животного в пробе молока из общего танка очень мала, главным образом потому, что в больших новозеландских стадах относительно небольшое количество вируса, выделяемое ТИ-коровами, «разбавляется» молоком неинфицированных животных в стаде.
Однако усовершенствованные методы экстракции РНК повысили чувствительность анализа, и ПЦР-тест на BVD теперь способен обнаруживать даже очень малые количества вирусной РНК в молоке. Неудивительно, что мы обнаружили: ПЦР молока из общего танка может выявить и ТИ-животных.
Вероятность получения положительного результата ПЦР на BVD в пробе сборного молока из-за присутствия ТИ-животного в стаде повышается, если:
- Стадо относительно мало (например, менее 200 голов).
- В стаде присутствует несколько ТИ-животных.
Невозможно с уверенностью определить, является ли единичный положительный результат ПЦР на BVD в молоке из общего танка следствием присутствия животных с транзиторной или персистентной инфекцией. Если эти два условия выполняются или могут выполняться, прежде чем приступать к дорогостоящим мероприятиям по тестированию и выбраковке животных ПИ-животных, разумно предположить, что положительный результат ПЦР на BVD может быть обусловлен наличием ТИ-животного(ых).
Если последующий ПЦР тест молока из общего танка на BVD (проведенный более чем через две недели после первого – чем больше времени между тестами, тем лучше) даёт отрицательный результат, это демонстрирует, что инфекция носила транзиторный характер (при условии, что все первоначальные коровы оставались в дойном стаде). Если последующий тест положительный, это с большей вероятностью указывает на присутствие ПИ-животного, но не исключает транзиторную инфекцию, так как инфекция может передаваться от коровы к корове внутри одного стада в течение многих месяцев.
Параллельный мониторинг уровня антител к BVD в молоке вместе с ПЦР-тестированием дает лучшее представление о ситуации в стаде. Низкий уровень антител в молоке указывает на восприимчивость стада к острой инфекции и, следовательно, на повышенную вероятность того, что любой положительный ПЦР-тест на BVD обусловлен транзиторной инфекцией. Если уровень антител в молоке высокий, это означает, что у большинства коров произошла сероконверсия из-за транзиторной инфекции, что говорит о их предшествующем контакте с другими ТИ- или ПИ-животными. Тем не менее, некоторые животные останутся восприимчивыми к транзиторной инфекции.
ПЦР-тестирование молока из общего танка на BVD остается ценным инструментом для определения наличия активной BVD-инфекции в стаде. Основная ценность этого теста заключается в подтверждении отсутствия циркулирующего вируса BVD в дойном стаде.
¹ Veterinary Microbiology 44 (1995) 77–92
Оригинал статьи: https://www.idexx.co.nz/files/bulk-tank-milk-bcd-pcr-test-results-interpretation.pdf