Более трех десятилетий назад была проведена первая успешная криоконсервация яйцеклеток, в результате которой родился живой новорожденный. С тех пор достижения в области криоконсервации и размораживания повысили эффективность этих процессов, что помогло использовать замораживание яйцеклеток в современных клинических условиях для предотвращения возрастного снижения фертильности. В 2013 году Американское общество репродуктивной медицины (ASRM - The American Society for Reproductive Medicine) и Общество вспомогательных репродуктивных технологий (SART - Society for Assisted Reproductive Technology) опубликовали заявления, указывающие на то, что криоконсервация яйцеклеток больше не считается экспериментальной терапией. Американский колледж акушеров и гинекологов (ACOG - The American College of Obstetricians and Gynecologists) также одобрил это руководство в 2014 году.
С тех пор количество проводимых циклов криоконсервации яйцеклеток неуклонно растет, что сопровождается увеличением объема литературы, посвященной этому. В настоящее время процедура осуществляется с помощью витрификации - метода, который обладает неоспоримыми преимуществами по сравнению с традиционным методом медленной заморозки. При витрификации используются высокие концентрации криопротекторов для охлаждения яйцеклеток в течение 15 минут, что позволяет свести к минимуму образование кристаллов льда и стабилизировать структурную целостность. Иными словами, витрификация стала основным методом криоконсервации яйцеклеток. В более ранних исследованиях, касающихся продолжительности криохранения, изучались результаты использования яйцеклеток, сохраненных методом медленного замораживания. Однако из-за перехода к витрификации в современных вспомогательных репродуктивных технологиях (ВРТ) и экстракорпоральному оплодотворению (ЭКО) эти исследования ограничены.
Исследования, посвященные результатам применения витрифицированных яйцеклеток, показали, что выживаемость при оттаивании составляет 80-90%, а уровень оплодотворения - 70-80%. Но лишь немногие отразили, как продолжительность нахождения в криохранилище влияет на клинические исходы у пациентов, которые возвращаются к использованию витрифицированных яйцеклеток.
В 2021 году ASRM выпустила рекомендации для проведения криоконсервации яйцеклеток, в которых отмечалось, что время хранения не влияет на выживаемость яйцеклеток или клиническую частоту наступления беременности. Однако исследования, упомянутые в руководстве, включали менее 10 циклов прогрева для яйцеклеток, криоконсервированных более 4 лет. Другие данные подтверждают, что продолжительность нахождения в криохранилище не влияет на выживаемость яйцеклеток, оплодотворение, клиническую беременность или живорождение. Тем не менее, среднее время хранения яйцеклеток составляло менее года, а средний возраст пациентов был моложе, чем у текущей популяции пациентов, перенесших операцию. Недавние исследования не выявили связи между длительным хранением в криохранилищах и продолжающейся беременностью после операции; однако эти результаты не были стратифицированы по продолжительности. В одной опубликованной серии случаев изучались клинические результаты применения яйцеклеток, хранившихся более десяти лет, которые продемонстрировали выживаемость при размораживании в диапазоне от 57 до 80% у каждой пациентки и рождение живого ребенка у четырех из шести пациенток.
Однако эта серия случаев была ограничена размером выборки: только шесть пациентов вернулись, чтобы использовать свои витрифицированные яйцеклетки. С увеличением числа пациентов, проходящих процедуру криокнсервации яйцеклеток, и снижением возраста, ожидается, что большее количество яйцеклеток будет храниться в течение длительного периода времени.
Таким образом, цель данного исследования - выяснить взаимосвязь между продолжительностью криохранения яйцеклеток и клиническими исходами, включая частоту эуплоидии и исходы беременности.
Источник: Roger S, Estevez S, Hernandez-Nieto C, Kripalani S, Ghofranian A, Baird M, Lee J, Slifkin R, Briton-Jones C, Copperman A, Danis R. Duration of cryostorage is not associated with rates of thaw survival, fertilization, blastulation and ploidy, or pregnancy outcomes of vitrified human oocytes. J Assist Reprod Genet. 2025 Feb;42(2):525-532. doi: 10.1007/s10815-024-03350-z. Epub 2025 Jan 3. PMID: 39753943; PMCID: PMC11871184.
В этом ретроспективном когортном исследовании оценивались клинические результаты у пациенток, которым с 2011 года проводилась операция по сохранению фертильности до 2023 года путем витрификации яйцеклеток по неонкологическим показаниям, а затем последующее размораживание и оплодотворение яйцеклеток для создания эмбрионов, используемых в циклах переноса. Циклы, включенные в это исследование, проводились в городском центре репродуктологии, входящем в состав крупного академического центра.
По каждой пациентке были собраны демографические данные (возраст на момент проведения операции и ИМТ), данные о контролируемой стимуляции яичников и лабораторные данные (антимюллеров гормон (АМГ), уровень фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) на 3-й день, уровень эстрадиола (Е2) на 3-й день, количество базальных антральных фолликулов (АФК) и др).
В анализ результатов беременности были включены только единичные эуплоидные эмбрионы, перенесенные на стадии бластоцисты в соответствии с запрограммированным циклом. Стоит отметить, что для бластоцист модифицировали систему Гарднера и было проведено ПГТ-А на анеуплодию. Полученные при биопсии эмбрионы были классифицированы как эуплоидные, анеуплоидные или мозаичные. Бластоцисты были подвергнуты криоконсервации сразу после биопсии для проведения ПГТ-А.
Все операции по переносу эмбрионов проводились в рамках запрограммированного цикла, а также подготовка полости матки эстрадиолом и прогестероном с использованием уже известных методов. Перенос бластоцисты был произведен на шестой день приема прогестерона. Критерии отбора бластоцист включали плоидность и морфологию. Учитывая, что для переноса были отобраны только эуплоидные бластоциты, при отборе эмбрионов приоритетной была оценка внутренней клеточной массы, за которой следовала оценка роста, а затем оценка трофэктодермы.
Успешно размороженную яйцеклетку определяли как неповрежденную яйцеклетку без признаков дегенерации. Основным результатом была выживаемость при размораживании, рассчитанная как количество интактных яйцеклеток после размораживания, деленное на общее количество подвергнутых криосохранению яйцеклеток.
Вторичные результаты включали коэффициент оплодотворения, рассчитанный как количество оплодотворенных яйцеклеток, деленное на количество размороженных яйцеклеток; коэффициент бластуляции, рассчитанный как количество созданных бластоцист, деленное на количество оплодотворенных яйцеклеток; коэффициент плоидности, рассчитанный как количество эуплоидных, анеуплоидных или мозаичных эмбрионов, разделенных на количество эмбрионов, перенесших ПГТ-А; частота имплантации; клиническая частота наступления беременности, доля пациенток, у которых при ультразвуковом исследовании обнаруживается сердечная деятельность плода; коэффициент живорождения; многоплодная беременность или два или более полюса плода с наблюдаемой сердечной активностью после предполагаемого монозиготного расщепления; биохимическая беременность, потеря беременности, наступившая после получения положительного теста на беременность с последующим снижением или отсутствием повышения уровня В-ХГЧ в сыворотке крови при последовательных измерениях через 48 ч после первого измерения и/или без обнаружения плодного яйца, визуализируемого при ультразвуковом исследовании влагалища на пятой неделе беременности; и клиническая потеря беременности, или потеря беременности, наступающая после наличия подтвержденного на УЗИ гестационного мешка.
Результаты: В общей сложности 5995 яйцеклеток соответствовали критериям включения. Они были разделены на группы в зависимости от продолжительности криоконсервации. В группу A вошли яйцеклетки, хранившиеся в криоконсервации от 0 до 2 лет; в группу B — от 3 до 5 лет; в группу C — от 6 до 11 лет. Достоверные различия были обнаружены при сравнении выживаемости при оттаивании, оплодотворении и скорости бластуляции между группами; однако после многомерного регрессионного анализа существенных различий обнаружено не было. Не было обнаружено достоверных различий в показателях эуплоидии, живорождения и клинической беременности между группами.
Вывод: после анализа количества лет, проведённых в криохранилище, как непрерывной переменной и с учётом сопутствующих факторов, было установлено, что длительность хранения в криохранилище не связана с ухудшением показателей выживаемости при размораживании яйцеклеток, а также с показателями оплодотворения, бластуляции, плоидности или исходов беременности.
#криоконсервация_япп
#витрификация_япп