Диско-диффузионный метод, также известный как метод Кирби-Бауэра, является одним из наиболее распространенных и простых способов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Он основан на способности антибиотика проникать через агар и подавлять рост бактерий🧫.
Процедура постановки.
1. Приготовление культуры бактерий: Для начала проводится посев бактерий, выделенных от пациента, на питательную среду. Затем полученные колонии пересаживают в жидкую питательную среду, чтобы получить суспензию бактерий определенной плотности.
2. Инокуляция: Готовую суспензию равномерно распределяют по поверхности агаровой пластины с помощью стерильного тампона или стеклянного шпателя. Важно, чтобы по всей поверхности агара был равномерный слой бактерий.
3. Нанесение дисков: На поверхность агара с засеянными бактериями наносятся бумажные диски, пропитанные определенными антибиотиками. Эти диски предварительно пропитываются стандартными концентрациями антибиотиков, что позволяет сравнивать результаты тестирования.
4. Инкубация: Пластина с нанесенными дисками помещается в инкубатор, где ее выдерживают при температуре 35-37°C в течение 16-18 часов. За это время антибиотик проникает из дисков в агар, создавая градиент концентрации, а бактерии начинают расти.
5. Оценка результатов: После инкубации вокруг дисков с эффективными антибиотиками образуются зоны задержки роста бактерий — зоны ингибирования. Диаметр этих зон измеряется в миллиметрах, и на основе стандартных таблиц определяется степень чувствительности микроорганизмов к данному антибиотику.
