Накануне Великой Отечественной войны московская Станция скорой помощи состояла из семи подстанций. После начала боевых действий работать приходилось в условиях повышенной опасности и светомаскировки города. Война потребовала от сотрудников напряжения сил.
С 22 июля 1941 года начались бомбардировки Москвы, продолжавшиеся до апреля 1942 года (по другим источникам – до июня 1943 года). Здания 2, 3, 4 и 5-й подстанций неоднократно оказывались в опасной зоне. Также осложнились условия работы в ночные часы: возникала опасность столкновения со встречными автомобилями, наезда на столбы и деревья, в темноте затруднялся розыск пострадавших и больных, а также оказание им медицинской помощи. И всё же Станция во время налётов не прекращала обычной работы.
283 сотрудника Станции, включая 46 врачей, 130 фельдшеров, 99 медбратьев и 8 представителей администрации, были призваны в Красную армию, причём 194 из них отправились на фронт уже в 1941 году.
Значительный вклад в работу Станции внесли студенты-медики старших курсов, которые составляли до 40 % среднего медицинского персонала.
Исходя из ситуации, работникам Станции пришлось пересмотреть некоторые прежние схемы работы. Основываясь на полученном опыте, руководство Станции в лице её начальника А. С. Пучкова и его помощника А. М. Нечаева подготовили и опубликовали в 1942 году в журнале «Советское здравоохранение» статью «Организация скорой помощи пострадавшим во время воздушных нападений», где были описаны правила оценки ситуации на месте происшествия и сортировки пострадавших.
За самоотверженную работу 228 сотрудников Станции были награждены медалью «За оборону Москвы».
Опыт работы московской Станции скорой помощи в период Великой Отечественной войны имеет большую ценность и используется нынешним поколением врачей и фельдшеров скорой помощи.