Является заключительным этапом подготовки срезов к изучению полученного материала под световым микроскопом.
Для окрашивания срезов готовится целая батарея спиртов. Спирты наливаются в специальные гистологические стаканы.
На этой стадии весь гистологический срез полностью покрыт краской.
Данный этап работы наз срезами требует художественного подхода, а именно буквально на глаз определять степень окрашивания.
Так проходит окраска. Надо вовремя извлечь стекло с образцами и дать стечь остаткам краски.
Очередное стекло со срезами проходит батарею спиртов и окунается в изопропаноловый спирт.
Лабораторная баночка с краской. В данном варианте идет окраска срезов методом Ниссля. То есть окрашиваются исключительно цитоплазма и ядра клеток. Выявляется вся цитоархитектоника среза.
Батарея спиртов в гистологических стаканах. Срез проходит по батареи спиртов, а именно 70%, 96%, изопропаноловый спирт и толуол. То есть постоянно повышается крепость, те самым происходит вытяжка лишней краски, воды и становятся видны структуры мозга.
Гистологический стакан имеет внутри специальные ребра, чтобы легче удерживались стекла с образцами в вертикальном положении, а также стеклянную крышку.
После этилового спирта наступает очередь изопропанолового.
Происходит последняя вытяжка краски, и затем все погружается в толуол.
Появилось четкое изображение внутренних структур - мозолистое тело, гиппокамп, неокортекс и так далее.
Надежда Александровна проверяет стекло с образцами в стакане с толуолом.
Надо заметить, что вся работа проводится исключительно под вытяжкой, и никак иначе!
Иногда батарею спиртов меняют.
Делается несколько таких стекол с образцами.
Так выглядят образцы срезов в гистологическом стакане. Для удобства просмотра, изображение повернуто на 90.
Пока не испарился толуол, срезы накрываем покровным стеклом.
Аккуратно накладывает покровное стекло.
Покровное стекло в сотни раз тоньше предметного стекла. И эта толщина строго выдерживается, иначе под микроскопом, на большом увеличении, рассмотреть технически ничего не получится.
Пузыри! Это прямо таки самый настоящий бич! Они так и норовят залезть между предметным и покровным стеклами. Но тут ничего не поделаешь - приходится их "выгонять", но главное, чтобы они не попали на сам гистологический образец.
Готовое стекло.
Четко видны подкорковые структуры.
Срезы в гистологических стаканах и степени вытяжки.
Продолжение следует...