Окраска по Нейссеру – это специальный метод микроскопического исследования, применяемый в микробиологии для выявления метахроматических гранул (зерен волютина) в бактериальных клетках. Эти гранулы представляют собой запасные вещества, которые окрашиваются в другой цвет, отличный от основного цвета клетки. Наиболее характерны для коринебактерий, в частности, для возбудителя дифтерии.
Принцип метода
Метод основан на способности метахроматических гранул изменять цвет основного красителя. При окрашивании уксуснокислым метиленовым синим зерна волютина приобретают интенсивную синюю или черную окраску, в то время как цитоплазма бактериальной клетки окрашивается в более светлый синий цвет.
Этапы окраски
- Фиксация мазка: Мазок с исследуемым материалом фиксируют для закрепления бактериальных клеток на предметном стекле.
- Окрашивание уксуснокислым метиленовым синим: Мазок обрабатывают раствором уксуснокислого метиленового синего в течение определенного времени (обычно 2-3 минуты).
- Промывание водой: После окрашивания мазок тщательно промывают водой для удаления избытка красителя.
- Просушивание: Мазок высушивают и рассматривают под микроскопом.
Значение метода
- Диагностика дифтерии: Окраска по Нейссеру является одним из важных методов диагностики дифтерии, позволяя обнаружить возбудителя – коринебактерию дифтерии и выявить характерные метахроматические гранулы.
- Идентификация других бактерий: Метод может применяться для идентификации других бактерий, содержащих метахроматические гранулы.
- Определение физиологического состояния бактерий: По интенсивности окрашивания и количеству метахроматических гранул можно судить о физиологическом состоянии бактериальных клеток.
Преимущества метода
- Простота: Метод относительно прост в выполнении и не требует специального оборудования.
- Высокая специфичность: Окраска по Нейссеру позволяет достоверно выявлять метахроматические гранулы.
- Быстрота: Результат можно получить довольно быстро.
Ограничения метода
- Неспецифичность: Метод не является абсолютно специфичным для коринебактерий дифтерии, так как метахроматические гранулы могут встречаться и у других бактерий.
- Требуется опыт: Для правильной интерпретации результатов необходим опыт микроскопирования.
Важно отметить, что окраска по Нейссеру является вспомогательным методом диагностики и должна сочетаться с другими методами исследования, такими как бактериологический посев и молекулярно-генетические методы.