Найти в Дзене
Лекция

Возбудители дифтерии, коклюша и паракоклюша.

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, вызываемое токсигенными штаммами дифтерийной палочки, характеризующееся развитием фибринозного воспаления в месте входных ворот, синдромом интоксикации и осложнениями со стороны сердечнососудистой, нервной и мочевыделительной систем. Семейство - Corynebacteriaceae Возбудитель -Corynebacterium diphtheriae По морфологическим и культуральным свойствам с возбудителями дифтерии сходна большая группа бактерий рода Corynebacterium, обозначаемых как: дифтероиды, коринеформные бактерии, палочки псевдодифтерии, палочка Хофманна. Дифтероиды размещаются параллельно (в виде "частокола"). Проявляют лишь лизогенные штаммы C.diphtheriae, инфицированные бактериофагом (β-фаг), несущим ген tox+ , кодирующий структуру токсина. Входными воротами являются: Коринебактерии локализуются в месте внедрения и продуцируют экзотоксин, который вызывает некроз эпителия. Если процесс развивается на слизистой дыхательных путей, покрытых однослойным цилиндрическим эпителием, в
Оглавление

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, вызываемое токсигенными штаммами дифтерийной палочки, характеризующееся развитием фибринозного воспаления в месте входных ворот, синдромом интоксикации и осложнениями со стороны сердечнососудистой, нервной и мочевыделительной систем.

Семейство - Corynebacteriaceae

Возбудитель -Corynebacterium diphtheriae

Морфология

  • Тонкая прямая или слегка изогнутая палочка
  • Утолщены на концах и напоминают булаву (греч. corynе – булава)
  • Характерен выраженный полиморфизм: могут встречаться нитевидные, ветвящиеся, кокковидные, дрожжеподобные формы
  • Неподвижны

Биологические свойства

  • Спор не образуют
  • Имеют микрокапсулу, пили
  • Легко окрашиваются анилиновыми красителями
  • Грамположительны
  • В мазках располагаются под углом друг к другу
  • Факультативные анаэробы

Зерна волютина

  • Волютин является запасом питательных веществ и энергии (неорганические полифосфаты)
  • Волютин более интенсивно воспринимает краситель
  • Располагаются на полюсах клетки
  • Количество зерен у дифтерийной палочки не превышает 6
  • У непатогенных коринебактерий – 18 – 20
Выявление зерен волютина (окраска по Нейссеру)
Выявление зерен волютина (окраска по Нейссеру)
Выявление зерен волютина
Выявление зерен волютина

По морфологическим и культуральным свойствам с возбудителями дифтерии сходна большая группа бактерий рода Corynebacterium, обозначаемых как: дифтероиды, коринеформные бактерии, палочки псевдодифтерии, палочка Хофманна.

Дифтероиды размещаются параллельно (в виде "частокола").

Культуральные свойства

  • Среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка)
  • Среда Клауберга (кровяно-телуритовый агар)
  • Среда Бучина (МПА + кровь + цистин+ хинозол (для подавления роста кокков) + метиленовая синька (для подавления роста дифтероидов)

Биологические варианты

  • gravis – грубый
  • mitis – тонкий
  • intermedius - промежуточный
intermedius
intermedius

Антигенная структура

  • термолабильный поверхностный К-антиген белковой природы
  • термостабильный соматический О-антиген
  • На основании антигенных особенностей выделяют 58 сероваров

Факторы вирулентности

  • поверхностные структуры липидной и белковой природы
  • ферменты агрессии (нейраминидаза)
  • гемолизин и некротоксин
  • гистотоксин, являющийся одним из наиболее сильных биологических ядов
  • летальная доза составляет 0,5 мг/кг массы тела

Способность к токсинообразованию

Проявляют лишь лизогенные штаммы C.diphtheriae, инфицированные бактериофагом (β-фаг), несущим ген tox+ , кодирующий структуру токсина.

Дифтерийный фаг  tox+
Дифтерийный фаг tox+

Патогенез

Входными воротами являются:

  • слизистые оболочки верхних дыхательных путей (миндалины, зев, носоглотка, гортань, трахея),
  • конъюнктива глаз,
  • кожа наружного слухового прохода,
  • раневая поверхность,
  • слизистая гениталий.

Коринебактерии локализуются в месте внедрения и продуцируют экзотоксин, который вызывает некроз эпителия.

Если процесс развивается на слизистой дыхательных путей, покрытых однослойным цилиндрическим эпителием, возникает крупозная пленка, рыхло связанная с подлежащей тканью.

В полости рта, зеве, глотке, где слизистая выстлана многослойным эпителием, образуется дифтеритическая пленка, плотно соединенная с подлежащей тканью.

Пленчатый налет представляет собой нити фибрина, клетки эпителия, эритроциты, лейкоциты, бактерий.

При одновременном поражении двух и более органов диагностируется комбинированная форма дифтерии.

Наиболее тяжело протекает гипертоксическая форма, которая может привести к смерти в течение первых суток.

В 1901 году Э.Беринг был удостоен Нобелевской премии по физиологии и медицине за работу над «сывороточной терапией, за её применение в лечении дифтерии, что открыло новые пути в медицинской науке».

Эмиль Адольф фон Беринг ( 1854-1917)
Эмиль Адольф фон Беринг ( 1854-1917)

Источником инфекции является человек - больной или бактерионоситель.

Пути передачи:

  • воздушно-капельный;
  • воздушно-пылевой;
  • контактно-бытовой (предметный);
  • алиментарный (через молоко).

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал:

  • пленчатые налеты ( берут на границе со здоровой тканью),
  • слизь из зева и носа,
  • пораженные участки кожи и слизистых оболочек.

Материал высевают на элективные среды.

Отличие возбудителей дифтерии от других коринебактерий:

  • не ферментирует сахарозу
  • не разлагает мочевину (проба на уреазу)
  • продуцирует фермент цистиназу
  • токсигенность
Определение уреазной активности
Определение уреазной активности

Определение цистиназной активности

Для выявления способности расщеплять цистин используется среда Пизу (сывороточный агар с добавлением цистина и уксуснокислого свинца в качестве индикатора выделяющегося H2S) посев производится уколом в столбик агара.

-12

Определение токсигенности

Проба Оухтерлони
Проба Оухтерлони

АКДС

Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина, состоит из взвеси убитых коклюшных микробов и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбированных на геле гидроксида алюминия.

  • Препарат вводят внутримышечно
  • Курс вакцинации состоит из 3-х прививок с интервалом 1,5 месяца (3 мес., 4,5 мес. и 6 мес.)
  • Ревакцинацию проводят в 18 мес. и в 6 лет.
  • АДС (АД)- в 14 лет и каждые 10 лет

Специфическая профилактика

Инфанрикс - вакцина для профилактики дифтерии, столбняка, коклюша (бесклеточная) трехкомпонентная адсорбированная жидкая.

Курс первичной иммунизации состоит из 3 доз вакцины - в 3; 4,5 и 6 месяцев;

Ревакцинацию проводят в 18 месяцев.

Инфанрикс Пента - вакцина для профилактики для профилактики дифтерии, столбняка, коклюша, полиомиелита и гепатита В.

В состав вакцины входят дифтерийный анатоксин, столбнячный анатоксин, коклюшный анатоксин, филаментозный гемагглютинин, пертактин, рекомбинантный HBsAg вируса гепатита В, инактивированные вирусы полиомиелита 1, 2 и 3 типа.

Курс первичной вакцинации состоит из трех доз вакцины, вводимых в 3, 4,5 и 6 месяцев.

Ревакцинация проводится однократно в 18 месяцев.

Пентаксим - вакцина для профилактики дифтерии и столбняка адсорбированная, коклюша ацеллюлярная, полиомиелита инактивированная, инфекции, вызываемой Haemophilus influenzae тип b, конъюгированная.

Содержит дифтерийный, столбнячный, коклюшный анатоксины, филаментозный коклюшный гемагглютинин и инактивированные вирусы полиомиелита типов 1, 2 и 3.

Курс первичной вакцинации состоит из 3 доз вакцины, вводимых в возрасте 3, 4,5 и 6 месяцев.

Ревакцинацию проводят в возрасте 18 месяцев однократно.

Тетраксим - вакцина для профилактики дифтерии и столбняка адсорбированная, коклюша ацеллюлярная, полиомиелита инактивированная.

Курс первичной вакцинации состоит из трех доз вакцины, вводимых в возрасте 3, 4,5 и 6 месяцев.

Ревакцинация проводится однократно в возрасте 18 месяцев.

Тетракок - адсорбированная вакцина для профилактики дифтерии, коклюша, полиомиелита и столбняка.

Первичная вакцинация состоит из трех инъекций с интервалом в 1 месяц у детей в возрасте от 2 месяцев.

Ревакцинация - через 1 год после третьей инъекции.

Возбудитель коклюша

Коклю́ш острое инфекционное заболевание дыхательных путей, основным симптомокомплексом которого являются приступы судорожного кашля.

Bordetella pertussis

СемействоAlcaligenaceae

Возбудитель - Bordetella pertussis

Биологические свойства

  • короткие палочки овоидной формы
  • грамотрицательные
  • окрашиваются биполярно за счет зерен волютина
  • неподвижны
  • спор не образует
  • облигатные аэробы

Bordetella pertussis

Средами для выделения возбудителя являются:

  • картофельно-глицериновый агар с добавлением крови (среда Борде - Жангу)
  • полусинтетическая среда казеиново-угольный агар (КУА)

Рост Bordetella pertussis на плотных средах

Биохимическая активность

  • B. pertussis выражена слабо.
  • Возбудитель коклюша не ферментирует сахара, не редуцирует нитраты, не обладает протеолитической активностью.
  • Бордетеллы продуцируют каталазу, гиалуронидазу, коагулазу, лецитиназу.

Антигенная структура

У бордетелл выделяют соматический термостабильный О-антиген и поверхностные термолабильные капсульные К-антигены или агглютиногены (так называемые факторы 1-16).

Фактор 7 является общим для всех бордетелл (общеродовой агглютиноген ), фактор 1 характерен для B. pertussis, фактор 14 – для B. parapertussis, фактор 12 – для B. bronchiseptica (видовые агглютиногены).

Видовые агглютиногены используются для получения монорецепторных сывороток, позволяющих дифференцировать представителей рода Bordetella.

Резистентность

Возбудитель коклюша вне организма быстро погибает (в течение нескольких часов).

В сухой мокроте он сохраняется в течение нескольких часов, в капельках аэрозоля – в течение 20-23 часов.

B. pertussis обладает высокой чувствительностью к действию ультрафиолетовых лучей, дезинфицирующих веществ и повышенной температуры. Под влиянием прямых солнечных лучей возбудитель погибает в течение 1 часа.

Возбудитель коклюша обладает чувствительностью к полимиксину, стрептомицину, тетрациклину, биомицину, но устойчив к пенициллину и сульфаниламидам.

Факторы вирулентности

Факторы адгезии:

  • фимбриальные агглютиногены (нитевидные выросты на поверхности бактерий, к которым в организме вырабатываются специфические антитела - агглютинины);
  • филаментозный гемагглютинин (поверхностный белок палочковидной формы);
  • белок наружной мембраны пертактин.

Токсины бордетелл:

  • эндотоксин (липополисахарид);
  • коклюшный экзотоксин (пертуссис-токсин);
  • внеклеточная аденилатциклаза (аденилатциклазныйтоксин-гемолизин);
  • трахеальный цитотоксин;
  • термолабильный дермонекротический токсин (дермонекротоксин);

Эпидемиология

Источник инфекции: больной человек типичной и стертой формами.

Механизм передачи: - аэрогенный

Путь передачи: - воздушно-капельный

Патогенез

  • Входными воротами для возбудителя коклюша являются слизистые оболочки верхних дыхательных путей (гортани, трахеи, бронхов).
  • Бордетеллы не проникают внутрь клетки и не поступают в кровь (при коклюше отсутствует бактериемия).
  • Они обладают тропизмом к клеткам реснитчатого эпителия.
Размножение коклюшных палочек на  мерцательном эпителии
Размножение коклюшных палочек на мерцательном эпителии

В патогенезе коклюша выделяют следующие стадии.

Первая стадия – адгезия возбудителя на клетках реснитчатого эпителия слизистой оболочки верхних дыхательных путей с последующей колонизацией эпителия. Возбудитель, попав в дыхательные пути, с помощью филаментозного гемагглютинина, пертактина, фимбриального агглютиногена прикрепляется к ресничкам мерцательного эпителия.

На поверхности ресничек эпителиальных клеток происходит размножение возбудителя (колонизация слизистой), в результате чего нарушаются функции клеток эпителия.

Вторая стадия – местное повреждение тканей токсинами микроба. После адгезии происходит размножение возбудителя на поверхности клеток эпителия (колонизация слизистой оболочки) и выделение трахеального цитотоксина, коклюшного токсина, аденилатциклазного токсина и дермонекротического токсина. Трахеальный цитотоксин вызывает паралич ресничек мерцательного эпителия, в результате чего нарушается отток слизи с поверхности мерцательного эпителия. Аденилатциклазный токсин обусловливает развитие воспалительных явлений и возникновение очагов некроза.

Стадия системных проявлений

В результате некротических поражений эпителия происходит постоянное раздражение рецепторов афферентных волокон блуждающего нерва.

Возбуждение передается в кашлевой центр продолговатого мозга, в результате этого развивается основной симптомокомплекс коклюша – приступы судорожного кашля.

Периоды заболевания

Инкубационный – продолжительность от 5 до 21-го дня (в среднем 7-10 дней).

Катаральный - продолжительность около двух недель.

Конвульсивный (судорожный) - продолжительность 4-6 недель.

Угасания– продолжительность периода – 2-3 недели.

Лабораторная диагностика

Основным является бактериологический метод

Исследуемый материал: секрет дыхательных путей (носоглотки, трахеи, бронхов).

Материал берут методом “кашлевых пластинок” или с помощью тампона с задней стенки глотки.

  • Иммунофлуоресцентный метод
  • Серологические методы (РА, РНГА, РСК)
  • ПЦР

Лечение

  • Проведение антибактериальной терапии (эритромицин, тетрациклин, левомицетин) в катаральный период.
  • В конвульсивный период антибиотики не оказывают влияния на течение заболевания.

Профилактика

Цельноклеточные вакцины:

  • АКДС (Россия);
  • Бубо-Кок (Россия);
  • Тетракок (Франция);
  • Тританрикс (Англия).

Бесклеточные (ацеллюлярные) вакцины:

  • Инфанрикс (Англия);
  • Гексавак (Франция);
  • Пентавак (Франция);
  • Триацелювакс (Германия).

В России зафиксирован резкий рост заболеваемости коклюшем.

В 2019 году заболевание выявили у 14 тыс. 406 граждан. Это почти на 40% больше, нежели в 2018 году.

С января 2020 года диагноз был поставлен у 1758 россиян. Большинство из них (89%) – это дети и подростки до 14 лет.

Возбудитель паракоклюша - Bordetella paraрertussis

Паракоклюш чаще возникает у детей 3-6 лет.

Инкубационный период при паракоклюше составляет 1-2 недели.

Клинически паракоклюш проявляется как легкая форма коклюша.

Заболевание сопровождается ринитом, гиперемией зева, субфебрильной температурой, кашлем.

Лечение паракоклюша проводится с помощью симптоматических средств.

В связи с легким течением заболевания антибиотики не используют.