Окраска по Романовскому
Краска Романовского состоит из азура II - 0,8; эозина ВА - 3,0; глицерина химически чистого - 250,0 и метилового спирта - 250,0.
Обычно пользуются готовой краской указанного состава. Однако аналогичную краску можно приготовить в лаборатории, для чего растворяют 1,0 азура 11 в л свежепрокипяченной дистиллированной воды или 1,0 эозина растворяют в 1 л свежепрокипяченной дистиллированной воды. Растворы красок хранят отдельно.
Для окрашивания одного препарата требуется 2-3 мл раствора краски. Летом мазки окрашиваются в течение 15-20 минут, зимой - 20-30 минут. При использовании готовой краски Романовского вначале проверяют ее рабочие качества, для чего красят несколько препаратов и проверяют их под микроскопом. Если избранный препарат еще недостаточно хорошо окрашен, то остальные докрашиваются в течение 5-10 минут. По окончании окрашивания краску смывают, а мазки высушивают.
Результат окраски
Хорошо покрашенный и отмытый препарат имеет красноватый оттенок. При продолжительной окраске мазки приобретают темно-фиолетовый оттенок. Если вода имела кислую реакцию, мазки приобретают красный оттенок; при щелочной реакции - синий оттенок.
При правильной окраске белые кровяные тельца дифференцируются следующим образом. Ядра вишнево-красного цвета, азурофильны. Наиболее сильно окрашены ядра лимфоцитов. Нейтральная мелкая зернистость, но без светящегося красноватого оттенка ядер. Чем более высокая щелочность раствора краски, тем крупнее и сильнее окрашена зернистость (адсорбция азура). Зернистость эозинофилов при окраске по Романовскому ярко-розовая, при более щелочных смесях - голубоватая. Зернистость базофилов редко сохраняется полностью; большая часть их обычно растворена, придавая протоплазме диффузно-азурофильную окраску, местами с пустотами и лиловатыми зернами. В протоплазме гистиоцитов крупные и более мелкие вишнево-красные азурофильные зерна. Зернистость моноцитов нежная, в виде точек и палочек, почти не видна, рассеяна по всей протоплазме. Тон протоплазмы голубовато-сероватый, а у лимфоцитов голубой. Эритроциты при нейтральной и кислой смеси краски розовые, при щелочной - голубоватые.