Отрывок из одной из старых монографий по ветеринарной гематологии. Орфография и пунктуация автора сохранены. Курсив – vmdg.ru
В основе лимфоидного лейкоза (лимфолейкоза, лимфаденоза) лежат гиперплазия (лимфатических узлов и селезёнки) и метаплазия (костного мозга) кроветворных органов, сопровождающиеся лимфоидной инфильтрацией других органов и тканей. Усиленная пролиферация лимфоидных элементов приводит к наводнению ими периферической крови. Лимфолейкоз — наиболее частая форма гемобластозов и описан почти у всех видов домашних и лабораторных животных.
Ранее гематологическое проявление лейкоза у крупного рогатого скота отмечается часто в возрасте 3—5 лет при хроническом её течении, а клинические симптомы — в возрасте 6 —10 лет. Продолжительность болезни не может быть ограничена какими-то определёнными сроками, так как она находится в прямой зависимости от характера течения патологического процесса. При хроническом его течении наблюдается нарастание гематологических показателей до сублейкемического уровня с последующей стабилизацией лейкозного процесса на длительное время. В этой начальной стадии продолжительность болезни исчисляется 3—8 годами, а при острой, подострой и обострённой формах — 1 —2 годами.
У крупного рогатого скота, как и у людей, хронический лимфолейкоз имеет медленное, среднее и быстрое течение, каждое из которых характеризуется соответственно лёгкой, средней и тяжёлой формами течения патологического процесса. Если при быстром течении болезни отмечается тяжёлая форма проявления процесса, то при медленном и среднем течении болезнь приобретает тяжёлую форму при его обострении. Сопутствующие патологии (пневмония, плеврит, перитонит и др.) обостряют лейкозный процесс с быстрым проявлением клинических симптомов и паталогоанатомических изменений.
Медленное, продолжительное течение болезни именуется «доброкачественной» формой, при которой на многие годы сохраняются продуктивность, воспроизводительная функция и удовлетворительное состояние животных. Лишь при последующем прогрессировании или обострении процесса течение болезни ускоряется, приобретая тяжёлый характер.
Периферическая кровь
Картина крови характеризуется увеличением относительного, а затем и абсолютного количества лейкоцитов. По мере прогрессирования лейкозного процесса наблюдается чередование алейкемического, сублейкемического и лейкемического состава крови. У исследованных нами животных, по данным предубойных анализов,
56,7% имели сублейкемический, а 43,3% — лейкемический состав крови. Притом у 29,4% животных количество лейкоцитов находилось в пределах 20—30 тыс./мкл, а у 13,7% — свыше 100,0 тыс./мкл. В лейкоцитарной формуле в 21,6% случаев отмечали умеренное повышение процента лимфоцитов (65,5— 80,0%), а в остальных число их составило 80— 100%. Если сублейкемический уровень лейкоцитоза (лимфоцитоза) характерен для начальной стадии с медленным течением болезни, то лейкемический — показатель быстрого прогрессирования процесса и наступления конечной стадии лейкоза.
Важное диагностическое значение имеет и качественный состав лимфоидных элементов крови. На ранних стадиях болезни клеточные элементы представлены в основном зрелыми лимфоцитами всех трёх величин (малые, средние и большие). Процентное соотношение между ними пока остаётся относительно стабильным. С прогрессированием болезни превалируют число средних и больших лимфоцитов. Зачастую появляются широкоцитоплазменные лимфоциты (ло 5— 10%), ридеровские и двуядерные формы (1—5%), пролимфоциты и лимфобласты (1,5%, рис. 28). Число последних повышается (до 10—15%) в конечных стадиях болезни при её обострении (рис. 29).
Одна из особенностей лимфолейкоза — появление в крови теней Боткина—Гумпрехта, клеток с рыхлым хроматином ядра и цитоплазмой, легко поддающихся разрушению в связи с пониженной их устойчивостью к воздействию внешней среды. Подобные клеточные элементы обнаруживают только в случаях с высоким лейкоцитозом или наличием в крови молодых клеток. Поэтому тени Боткина — Гумпрехта образуются в мазках из числа «легкоранимых» молодых клеток, которые имеют нежное строение и легко поддаются разрушению. Их необходимо отграничивать от разрушенных зрелых лимфоцитов, полученных из-за технических погрешностей при приготовлении мазков крови.
Красная кровь в начальной стадии лимфолейкоза изменяется довольно редко. Количество эритроцитов и уровень гемоглобина остаются па нижней границе нормы. На поздних стадиях болезни анемия становится постоянным признаком, она развивается параллельно с прогрессированием лейкозного процесса, время и темпы нарастания которых почти совпадают. В тяжёлых случаях наблюдается жёсткая анемия, когда количество эритроцитов и уровень гемоглобина в крови уменьшается соответственно до 2,5 млн/мкл и 5,2 г% (52 г/л – прим. vmdg.ru).
Основная причина развития анемии — трансформация костномозгового кроветворения в сторону лимфоцитообразования, т. е. лимфоидная метаплазия костного мозга. При этом в связи с подавлением эритробластического ростка резко суживается пролиферация клегок красного ряда. Последнее подтверждается равномерным уменьшением числа всех переходных форм эритробластических клеток. Причина анемии заключается в замещении красного костного мозга лимфатической тканью, а не в нарушении дифференциации эритро- и нормобластов.
Вместе с тем наблюдаются случаи, при которых степень анемии не зависит от лимфоидной метаплазии костного мозга. При сильной лимфоидной инфильтрации его отсутствует анемия в крови, и наоборот, анемия не сопровождается значительным поражением костного мозга. Следовательно, существуют и другие, пока невыясненные причины, вызывающие анемию в периферической крови.
Клинические симптомы и патологоанатомические изменения
Клинические симптомы и патологоанатомические изменения на ранних стадиях заболеваний почти отсутствуют. При длительном течении патологического процесса обнаруживается незначительное набухание отдельных регионарных лимфоузлов или селезёнки. Неспецифические клинические симптомы часто остаются незамеченными. При умеренном увеличении размеров селезёнки или регионарных лимфоузлов общее состояние животного не ухудшается, системы органов функционируют нормально. Чрезмерное увеличение селезёнки или поражение сердца обусловливают нарушения сердечной деятельности. Из специфических симптомов отмечается увеличение поверхностных или доступных ректальному исследованию глубоких паховых лимфоузлов.
Под кожей в области голодной ямки и подгрудка появляются мелкие опухолевые образования величиной с лесной орех. Степень повышения размеров лимфоузлов бывает разной вследствие неодновременного их поражения. По частоте поражения лимфоузлов глубокие паховые опережают поверхностные.
По нашим наблюдениям, в развернутой и конечной стадии селезёнка была увеличена в 79,1% случаев, а лимфатические узлы — в 76,7% случаев, в том числе слабо — соответственно в 18,6 и 16,3, сильно — 23,3 и 11,6 и умеренно — в 37,2 и 48,8% случаев. Несмотря на поздние стадии болезни, у некоторых животных отмечали увеличение одного из лимфоидных органов. Так, почти в половине случаев (51,2%) селезёнка и лимфоузлы были увеличены одновременно. В 27,9% случаев была увеличена лишь селезёнка, а в 25,6% — только лимфатические узлы.
Увеличение селезёнки обычно сопровождается лейкемической картиной крови, однако уровень лейкоцитоза не полностью зависит от массы и размера её. В свою очередь, гиперлейкоцитоз не всегда зависит от размеров селезёнки, так как в этих случаях усиленная пролиферация лимфоцитов происходит в лимфатических лимфоузлах. Разрыв увеличенной селезёнки часто является причиной гибели животного. Поверхностные и внутренние лимфоузлы почти всегда увеличиваются в размерах одновременно, однако при поражении последних наружные могут оставаться интактными. Единовременное поражение наружных и внутренних лимфоузлов отмечали в 32,6% случаев на поздних стадиях болезни. У остальных животных были увеличены (67,4%) только внутренние лимфоузлы.
Увеличенные лимфоузлы имеют гладкую поверхность, сохраняют подвижность и не срастаются с окружающими тканями. При пальпации имеют упругую консистенцию. На разрезе рисунок между мозговым и корковым слоями стёрт, поверхность разреза имеет саловидность серого цвета, иногда на поверхности разреза отмечают кровоизлияния.
На поздних стадиях развития лимфолейкоза наблюдаются увеличение размеров печени (в 23,3% случаев), опухолевое поражение сердца, желудочно-кишечного тракта и других органов (в 10% случаев). Учитывая то, что развёрнутая и конечная стадии болезни в большинстве своём отмечаются у животных старшего возраста, то соответственно обнаруживаются и всевозможные патологии другого характера (пневмония, плеврит, перикардит, гепатит, гепатохолангит, мастит и др.). В одних случаях они сопутствуют лейкозу, а в других — способствуют обострению лейкозного процесса.
Цитоморфологические изменения в костном мозге
Специфика лимфолейкоза заключается в том, что вначале поражается лимфоидная ткань, а затем — костный мозг. По мере образования и расширения очагов лимфоидной ткани в костном мозге происходит нарушение костномозгового кроветворения. Оно выражается в уменьшении миелобластических и эритробластических клеток в результате полного или частичного подавления белого и красного ростков, лимфоидной метаплазии. Степень поражения костного мозга в какой-то степени зависит от давности и интенсивности течения лейкозного процесса и уровня лейкоцитоза в периферической крови. Вместе с тем в ряде случаев костный мозг остается интактным.
У исследованных нами животных количество миелобластических клеток в среднем по группе было уменьшено до 23,4%, а эритробластических — до 23,8%. Повышенный процент лимфоидных клеток разной степени зрелости составил в среднем 39,3, что отражает лимфоидную метаплазию костного мозга в средней степени (рис. 30).
При сильной степени лимфоидной метаплазии в миелограмме наряду со зрелыми лимфоцитами появляются пролимфоциты и лимфобласты, увеличивается число ридеровских и двуядерных форм, а также недифференцированных и ретикулярных клеток. Умеренная лимфоидная метаплазия обычно наблюдается при хроническом, длительном компенсированном состоянии процесса, а сильная, или тотальная, — при обострении или интенсивном течении болезни (рис. 31). Чем выше лимфоцитоз в крови, тем больше лимфоцитов в миелограмме. Однако эта зависимость отмечается не во всех случаях. Так, у одной коровы с высоким (64 тыс/мкл) лейкоцитозом процент лимфоцитов в миелограмме составил всего 24,8, а у другой — с 51,8 тыс/мкл лейкоцитов — уже намного больше, т.е. 58,6%. Или у двух коров с гиперлейкоцитозом (462,0 и 237,6 тыс/мкл) процент лимфоцитов в миелограмме составил 65,5 у первой и 75 у второй.
Анализ каждой миелограммы в отдельности показал, что степень подавления белого и красного ростков, а также лимфоидной метаплазии неодинакова. Количество миелобластических клеток в миелограммах колебалось в пределах 5,2—40,2%, эритробластических — 3,6—40,3, а лимфоидных — 19,6 —75,8%. Более часто отмечали одновременное подавление
обоих ростков и реже — одного из них. Подавление красного ростка сопровождалось анемией в периферической крови, что было характерным для поздних стадий лимфолейкоза. В 7% случаев при жизни животных не удавалось получать пунктат костного мозга, что свидетельствовало о аплазии последнего. После убоя животных на распиле грудной кости во всех сегментах устанавливали жировое перерождение. В большинстве своём это наблюдалось у животных старших возрастов с длительным периодом заболевания.
При гистологическом исследовании костного мозга (проведённым Т.П. Кудрявцевой) в начале болезни отмечалось нормальное соотношение между паренхимой и жировой тканью. При этом обнаруживали лишь отдельные вкрапления лимфоидных клеток. В поздних стадиях происходило постепенное вытеснение жировой ткани размножающимися в паренхиме лимфоидными клетками на фоне угнетения эритро- и миелопоэза.
Постепенное и неодновременное поражение всех сегментов грудной кости является нередко причиной неодинаковой степени лимфоидной метаплазии костного мозга при динамическом исследовании животного.
Цитоморфологические изменения в лимфоидных и других органах
Если увеличение размеров селезёнки наблюдается не во всех случаях, то микроскопические изменения обнаруживаются почти у всех больных животных. В начальной стадии в мазках из пунктатов селезёнки или в мазках-отпечатках бывает несколько увеличено количество больших лимфоцитов и пролимфоцитов. Число этих клеток превалирует над количеством малых и средних лимфоцитов. У больных с продолжительным или интенсивным течением процесса участки мазков в несколько полей зрения состоят преимущественно из одних пролимфоцитов с нуклеолями (синоним – нуклеолами – прим. vmdg.ru). При сопутствующих лейкозу патологиях другого характера в мазках селезёнки несколько увеличено число плазматических клеток, нейтрофилов и эозинофилов. Количество этих клеток повышено на фоне некоторого омоложения лимфоидных элементов.
В развёрнутой и конечной стадиях болезни и при поражении селезёнки клеточные изменения бывают выражены более интенсивно. В одних случаях пролимфоциты и лимфобласты как бы вкраплены между зрелыми лимфоцитами (рис. 32), а в других – клеточные элементы представлены только пролимфоцитами и частично лимфобластами. Чем больше увеличен размер селезёнки, тем выше степень омоложения клеток. При этом зрелые лимфоциты вытесняются их молодыми формами.
Если при хроническом и подостром течении омоложение клеток происходит в основном за счёт пролимфоцитов, то при обострении процесса и его интенсивном прогрессировании число лимфобластов превалирует над количеством остальных видов клеток.
В редких случаях, несмотря на увеличение размера селезёнки, клеточные элементы в мазках представлены в основном зрелыми лимфоцитами. У таких животных усиленная пролиферация лимфоцитов происходит без задержки дифференциации молодых форм клеток. В этих случаях цитоморфологические исследования пунктата селезёнки не имеют диагностического значения. Обилие лимфоцитов в мазках и отсутствие других видов клеток могут дать подозрение па лейкоз. При гистологическом исследовании ткани селезёнки в подобных случаях установлено увеличение диаметра фолликулов селезёнки за счёт перифолликулярных зон, которые обогащаются зрелыми лимфоидными элементами и становятся более широкими — расплывчатыми. Поэтому и в мазках отмечают одни зрелые лимфоциты. Однако и при гистологическом исследовании более часто обнаруживают замещение центра размножения молодыми клетками — лимфобластами. По мере увеличения фолликулов последние сливаются между собой и заполняют красную пульпу. В этих случаях на разрезе селезёнки становятся неразличимыми границы между белой и красной пульпой. В процессе этого слияния и отмечается омоложение клеток разной степени.
Изменения в селезёнке у разных животных отличаются по интенсивности омоложения и по характеру клеток. В одних случаях омоложение происходит за счёт пролимфоцитов и больших лимфоцитов, в других — преимущественно за счёт лимфобластов, а в третьих — за счёт тех и других. Степень омоложения зависит от стадии болезни и размера увеличенной селезёнки. В начале поражения селезёнки в мазках обнаруживают маленькие участки с пролимфоцитами, или единичные экземпляры их и лимфобластов бывают вкраплены между зрелыми лимфоцитами. Подобные участки с единичными или небольшими группами клеток (по 2 – 3 и более) отмечали и при гистологическом исследовании. Этот очаговый характер поражения селезёнки в начале болезни является причиной частого необнаружения патологических изменений.
По мере прогрессирования болезни и увеличения размеров селезёнки число молодых клеток становится больше, и в конце процесса они почти полностью замещают нормальную ткань.
При омоложении клеток в селезёнке не всегда в периферической крови обнаруживают молодые клетки или обнаруживают, но в малом количестве. Значит, как правильно указывает Т.П. Кудрявцева, гиперплазия клеточных элементов сопровождается не только потерей способности к последовательной дифференциации, но и к вымыванию из мест своего образования.
Таким образом, омоложение в разной степени клеточных элементов в селезёнке с счёт пролимфоцитов и лимфобластов является дифференциально-диагностическим тестом для лимфоидного лейкоза.
Степень микро- и макроскопических изменений лимфатических узлов зависит также от стадии болезни и вовлечения в процесс тех или иных желёз. В начальной стадии болезни пункция лимфоузлов может не дать ожидаемых результатов, так как они поражаются редко и в поражённых лимфоузлах степень омоложения клеток бывает незначительной.
По мере прогрессирования лейкозного процесса в поражённых лимфоузлах происходит почти такое же омоложение клеток (рис. 33), как и в селезёнке. Вначале увеличивается количество больших лимфоцитов с более светлым и рыхлым хроматином ядра и пролимфоцитов. Постепенно исчезают другие виды клеток (плазматические, нейтрофилы и т. д.). Однако при наличии какой-либо другой патологии в мазках регионарных лимфоузлов бывает увеличено число нейтрофилов, плазматических, ретикулярных или других видов клеток.
В трёх случаях в несколько набухших, увеличенных лимфоузлах омоложение клеток авторы не наблюдали, гиперплазия узла происходила за счёт зрелых лимфоцитов. В остальных случаях отмечали омоложение клеток, степень которого зависела от размера увеличенных лимфоузлов. У одного и того же больного степень омоложения клеток в различных лимфоузлах была неодинаковой, что говорит о неодновременном вовлечении их в патологический процесс.
В большинстве своём омоложение происходит за счёт пролимфоцитов с нуклеолями, они бывают вкраплены между зрелыми лимфоцитами или образуют сплошные пласты из однообразных клеток. В некоторых случаях обнаруживают повышение числа лимфобластов. В поздних стадиях болезни и при увеличении размера лимфоузла количество последних превалирует над числом остальных видов клеток. При гистологическом исследовании фолликулы приобретают значительные размеры и теряют чёткость границ. В этих участках отмечают большое количество молодых клеток. В поздних стадиях болезни при слиянии фолликулов и стирании границ коркового и мозгового слоёв в мазках превалирует количество клеток типа пролимфоцитов и лимфобластов, а в ряде случаев они полностью замещают нормальную ткань со зрелыми клетками.
Лимфоцитарную, а в тяжёлых случаях пролимфоцитарную и лифобластическую инфильтрации наблюдают и в других органах при их поражении. При малом количестве лимфоидных элементов в мазках печени трудно установить их происхождение. В этом случае лимфоциты могут быть занесены током крови, вследствие чрезмерного переполнения венозных синусов печени лимфоидными клетками, имеющими в своей основе функциональные нарушения селезёнки, сердца и других органов. Большое количество клеток в мазках, особенно сплошных участков лимфоидных клеток в мазках-отпечатках, даёт основание считать их производными инфильтративных разрастаний в различных участках печёночной ткани. Эти две возможные причины обнаружения повышенного числа лимфоидных элементов в мазках из печени подтверждаются и гистологическим исследованием.
В мазках отпечатках их других поражённых органов (сердце, почки, органы пищеварения) обнаруживают скопления лимфоидных клеток, число которых зависит от степени вовлечения органа в патологический процесс. Инфильтративные разрастания бывают в виде отдельных скоплений клеточных элементов или в виде сплошных пластов из этих клеток. Очаговые инфильтрации наблюдаются чаще, чем диффузные.
Таким образом, с помощью цитоморфологических и гистологических исследований поражённых внутренних органов устанавливают инфильтративные разрастания из лимфоидных клеток. Поэтому мазки отпечатки из поражённых органов можно применять как экспресс метод для установления характера клеточной инфильтрации с целью дифференциальной диагностики.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология. – М.: Колос, 1995. – 256 с. 8 л. вкл. (ISBN 5-10-00-29-48-X)